乙烯释放量测定实验-猕猴桃采后生理与贮藏保鲜

实验4－1　乙烯释放量的测定

一、基本原理

乙烯是重要的植物内源激素之一，以气体形式存在。乙烯能促进猕猴桃的后熟衰老过程。在猕猴桃贮藏实践中，常常要检测猕猴桃中内源乙烯的释放量。通常，先收集猕猴桃释放出的乙烯气体样品，利用气相色谱手法测定气体样品中乙烯的浓度。然后计算出猕猴桃乙烯释放量。

气相色谱具有灵敏度高、稳定性好等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同。因此，物质的分配系数（或吸附能力）不一样。当含混合物的待测样（含乙烯的混合气体）在流动相（即载气，通常为N₂）的带动下，与固定相不断地发生分配、吸附、解吸和再分配、再吸附解吸的过程，最后依照分配系数大小顺序依次被分离后。利用氢火焰离子化检测器（FID）可检测到混合气体中所含的乙烯。检测信号的强弱可以反映出待检物质的含量。在记录仪上呈现色谱峰。要使待测物得到充分的分离，就需要一种合适的固定相。乙烯往往与乙炔、乙烷难以分离，而采用GD×502、Porapak80－100等作为固定相则可得到比较满意的效果。

二、仪器及用具

带有空心橡胶塞的玻璃容器（塞上带有取气口）、玻璃样品瓶（300 ml，带有橡胶塞）、注射器（1 ml）、天平（600～1000 g）、量筒（1000 ml）、标准乙烯、标准N₂、Trace GC Ultra气相色谱仪。

三、实验步骤

（一）气相色谱配置及工作条件

色谱条件：氢火焰离子化检测器（FID），汽化室、检测室温度为150℃，N₂为载气（载气流量为14 ml/min），H 2为燃气，空气为助燃剂，不锈钢填充柱（DB－5），柱温70℃，外标法定量。

（二）乙烯标准曲线的制作

取300 ml样品瓶，倒置，将氮气导管伸入到瓶中充分通气，以将瓶中空气排出。经长时间排气后，用橡胶塞密封瓶口。再往样品瓶中注射加入一定量的标准乙烯。分别配制含量为0．0005%、0．001%、0．0015%、0．002%（体积分数）的乙烯气体，充分摇动。然后，用注射器从容器橡胶塞上取1．0 ml气体，在气相色谱仪上进样测定，确定乙烯出峰时间，以峰面积为横坐标、乙烯浓度为纵坐标制作标准曲线。

（三）气体收集与测定(www.xing528.com)

将1 kg左右的猕猴桃果实置于一定体积的干燥器中，密闭放置1 h后。用注射器从容器橡胶塞取气口中顶空取1．0 ml气体，在气相色谱仪上进样测定，经色谱仪检测后得到色谱图，加载标准曲线后（面积外标法），经过微机处理，即可得到进样气体乙烯浓度。

（四）密闭空间体积测量

通过排水法测定放置猕猴桃的干燥器中剩余空间体积（即密闭空间体积）。

四、实验结果与计算

乙烯释放量［μl/（kg·h）］＝a×（V 0－V 1）÷M÷t

式中：a——气相色谱仪的读数（10^－6 ml/ml）；

　　　V ₀——干燥器体积（L）；

　　　V ₁——果实体积（L）；

　　　M——样品总量（kg）；

　　　t——样品放置时间（h）。