发酵操作流程、注意事项

一、任务目的

1.学会发酵前准备、接种、取样、补料和放料操作。

2.学会对发酵过程进行监控，并对产物进行检测。

二、任务内容

1.发酵准备。

2.接种。

3.取样。

4.补料。

5.放料。

6.清场。

三、相关知识

种子制备知识；接种注意事项；补料原理、发酵过程控制；产物检测。

四、任务所需的材料和设备

1.仪器设备　5BGZA型号机械搅拌发酵罐，空气压缩机，BX-2000循环冷冻机等。

2.试剂　葡萄糖，硫酸铵，尿素，消泡剂。

3.种子。

五、任务实施

（一）发酵准备

1.消毒结束后，取下保护罩。

2.将进气过滤器F1与控制箱左侧空气出口连通，开弹簧夹，开空气流量计调节阀，对发酵罐进行通气，调整空气流量每分钟3～5L。(www.xing528.com)

3.当温度到达工艺要求时，调节搅拌转速，空气流量，罐压，标定溶氧电极的斜率及校正pH电极的零点。

4.开阀W03使夹套充满水。

（二）接种

调节进气量至每分钟3～5L，旋松接种口，在火焰保护下，打开接种口，倒入种子，然后旋紧接种盖，移去火焰圈。在控制器的初始化菜单上按F1设定“发酵批号”并确认，再按F2发酵开始并确认，发酵数据才能自动保存。设定发酵过程参数及适宜的控制模式。

（三）补料操作

1.硅胶管安装　将经灭菌消毒的补料瓶及输液管放置于搁架上，开蠕动泵透明的防护盖，掰开蠕动泵进出口处的白色管夹，将硅胶管（近料瓶端）嵌入入口处的管夹并夹紧，用手转动蠕动泵泵头，同时将硅胶管沿蠕动泵凹槽安装直至蠕动泵出口处，然后开蠕动泵手动开关约10秒钟左右再夹紧蠕动泵出口处管夹，关手动开关。

2.将乙醇棉球放在罐盖补料口内，然后将针头插入并穿透密封盖。

3.打开蠕动泵手动开关，使输液管中充满料液。置蠕动泵开关于自动状态。

4.酸碱液、消泡剂操作同补料操作。

（四）取样

用弹簧夹J2夹紧取样器K8与K6口间的平衡硅胶管，将出料管放入接料瓶，开弹簧夹J1，发酵液被压入接料瓶（也可以减少排气增加罐压加快取样速度），开J2，利用罐内空气排出取样管内残料后放开J1，夹紧出料口。

（五）放料

同取样操作。

六、归纳总结

发酵操作要点和注意事项。

七、拓展提高

设备常见故障及排除方法。

（宋小平）