毒理学安全性评价骨髓细胞学研究结果解释标准操作

第五节　CFU-GM试验的结果解释的标准操作程序

一、概　述

人类和啮齿类CFU-GM试验，可产生重复的毒性值，表示为抑制浓度（Inhibitory Concentration，IC）。为了比较不同化合物的骨髓毒性作用，该值具有重要价值。而且，TC值也可应用于预测处理动物引起严重可逆性嗜中性白细胞减少症的急性全身暴露剂量。为了证实回归具有统计学上的显著性（P＜0.05），内部线性对照的初步统计学分析是重要的。

二、内部对照

为了证实在接种细胞数量与CFU-GM克隆之间的线性关系，评价内部对照（CTRL₁、CTRL₂、CTRL₃）的线性回归斜率，通过计算毒物抑制的百分比与在D₀中 计数CFU-GM的绝对值，标准化剂量反应曲线（剂量对照假定为100％反应），在 CTRL₃和D₀之间的比较，可以考虑评价溶剂的毒性效应。

三、评价抑制浓度

根据实验室最佳拟合模型，详细说明该数据，研究该变异和计算IC值。非常简单和有效的方法是应用Reed和Muench公式，它们在被测定的产生抑制效应的剂量之间的插入值，获得了好的和一致性结果。

在剂量-反应动力试验中，（在D₁到D₈CFU-GM数量和D₀CFU-GM数量之间的百分比率）克隆形成百分比是与毒物剂量的连续增加有关，计算IC₅₀的实例如下：(www.xing528.com)

logIC₅₀=logDx+logDy/Dx×（＞50％）−50/（＞50％）−（＜50％）

Dx：是相应于百分比克隆形成大于50％的较高的毒物剂量（＞50％）

Dy：是相应于百分比克隆形成小于50％的较低的毒物剂量（＜50％＝

四、预测模型

计算人类MTD（P-HuMTD）的预测模型是根据下列公式：

P-HuMTD=实际啮齿类LD₁₀×人类IC₉₀/啮齿类IC₉₀

在CFU-GM试验中测定IC₉₀值，应注意下列问题：①人类MTD值定义为在临床试验中，在大部分病人引起严重毒性时，发现的剂量水平；②啮齿类LD₁₀值，从文献和临床前研究中获得；③这个预测模型，已经应用于预认证研究，表面体外CFU-GM抑制与体内绝对嗜中性白细胞计数最低值程度具有相关性。种属间的药物动力学差异，可能是由于MTD高达4倍的差异所致。预测模型没有考虑到这种差异的来源，一个“精确预测”模型，可以被认为是在实际人类MTD值的4倍之内的人类MTD的预测。