骨髓涂片评价及解释结果

第三节　骨髓涂片的评价和结果解释

一、概述

在对骨髓涂片进行评价时，一定要结合全血细胞计数来评价和分析。例如当一只动物的血小板下降时（如血小板减少症），那么巨核细胞浓度评价就特别重要。

二、细胞数量

应用低倍镜扫描骨髓涂片，100倍放大，以评价出现的细胞数量和脂肪数量。被血液稀释的骨髓样品难于评价细胞数量。正常骨髓细胞数量变异较大，但是在一般情况下，由大约50％的骨髓细胞和50％的脂肪细胞组成。但当骨髓粒系和红系细胞产物，对细胞丢失、破坏、消耗反应性增加时，细胞数量增加。细胞数量增加的异常原因包括淋巴细胞增殖和骨髓粒细胞增殖紊乱和其他肿瘤性紊乱。概括地讲，如骨髓纤维化、特定感染性制剂（如犬的Ebrlichia、猫的白血病病毒）、雌激素毒性（犬）、药物毒性（包括常用的化疗剂），对骨髓具有毒性的化学物、放射线、免疫介导的干细胞破坏性紊乱，可能使骨髓细胞数量下降。细胞数量下降被定义为“hypoplasia”“发育不全，细胞减少”，完全没有细胞则定义为“aplasia”“再生障碍”。细胞减少仅在一个细胞系是相对常见的。再生障碍通常涉及所有细胞系，但红系和粒系细胞的再生障碍是罕见的。当用骨髓涂片不能确定细胞数量时，应进行组织病理学评价。

三、巨核细胞

应用低倍镜（Χ10）可以估计巨核细胞的数量，即增加（如增生）或下降（如骨髓发育不良）或正常。

这种估计结果的解释依据是外周血的血小板浓度。在高空泡的区域正常情况下含有少数巨核细胞，除非样品被稀释，原则上，在玻片上至少出现5～10个巨核细胞；在增加血小板消耗的动物（如弥散性血管内凝血）或血小板被破坏（免疫介导的血小板减少症动物）的动物，骨髓中巨核细胞浓度增加；动物巨核细胞增生时，可能在每张玻片中出现高过50或更多的巨核细胞，在巨核细胞增生时可以看到原巨核细胞、幼巨核细胞，并且细胞较小、不太成熟的巨核细胞浓度增加。

在患有巨核细胞增生的血小板减少病人中，血小板的体积通常会增加，因为血小板的早期释放，体积的增加类似于不成熟红细胞体积的增加。血小板减少症动物由于缺乏血小板，在骨髓涂片中非常少甚至没有巨核细胞，在没有红系和粒系发育不良的情况下，巨核细胞发育不良是罕见的，原因可能是免疫介导的巨核细胞遭到破坏。

四、粒系/红系比例

（一）概述

粒系/红系比例应用低倍镜（10倍）观察，在玻片不太厚的适当区域，细胞没有破碎，选择该区域用于骨髓细胞检查。应用50、100倍油镜检查。在高倍镜下，可以识别红系和粒系的前体细胞，可以评估粒系/红系（M/E）比例，分类计数粒系和红系共计300～500个细胞，检查几个不同区域并进行这种分类计数，因为可能有些区域可能以粒细胞为主，其他区域以红系为主。

正常的M/E比例因动物种属不同而存在差异，但是，在一般情况下，它们的分布范围在0.5/1～3/1。在两种细胞系中，每一种的下降和增加均可改变M/E比值，根据全血细胞计数结果解释这种改变，特别是群集的细胞体积和嗜中性粒细胞浓度。例如：如果M/E比值增加，该动物是贫血，原因是该血嗜中性粒细胞浓度正常，因红细胞下降而使该比例增加，而不是嗜中性粒细胞的增加。相反，该动物不是贫血，那么增加的M/E比例是由于嗜中性粒细胞的增加，而不是红细胞的下降。

（二）M/E比值下降

M/E比值下降可能表示增加红细胞数，如再生障碍性贫血时，红系增生、嗜中性粒细胞下降（粒系发育不全），或两种情况均有。在没有红系发育不全的情况下，粒系发育不全罕见。但是当出现时，通常与骨髓发育和骨髓增生紊乱有关。

（三）M/E比值增加(www.xing528.com)

M/E比值增加可能表示粒细胞数增加（如粒系增生）、红系下降（如红系发育不全），或两种情况均有。粒细胞增生通常是由于炎症，但是它也能出现在免疫介导的嗜中性粒细胞破坏或病毒诱导的骨髓损害的恢复期动物身上，如感染细小病毒的犬和猫，以及猫患传染性粒细胞缺乏症时。红系发育不全的原因包括肾衰、内分泌病、炎症疾病性贫血。炎症疾病性贫血和慢性疾病贫血，是比较常见的动物红系发育不全的原因。

粒系增生和增加铁贮存（如血铁质）通常在患病动物的骨髓涂片中可以看到。单纯红细胞系发育不全是罕见的，但是，当出现时，通常是由于免疫介导的非常早期红系前体细胞被破坏。

五、骨髓细胞成熟的规律

母细胞最终产生16～32个成熟细胞，因此80％～90％的细胞应该是更成熟形式的细胞，如在粒系中，包括晚幼粒细胞、杆状粒细胞和分叶粒细胞；红系中包括中幼红、晚幼红和嗜多染红细胞。成熟的次序发展通常被称为“金字塔”，少数不成熟形式的细胞在顶端，众多较成熟形式的细胞在底部。

红系和粒系的前体的成熟紊乱，在患白血病的骨髓发育不良时能看到，但是，在非肿瘤情况下也可以看到。

红系成熟发育的停止，经常在中幼红阶段，在免疫介导的不成熟红系细胞被破坏时的动物骨髓细胞中可以看到。这些动物不具有典型再生反应，如通常在免疫介导的溶血性贫血时可以看到，在这种动物的骨髓中，晚幼红和嗜多染红细胞经常下降甚至缺乏。

粒系细胞发育成熟有类似的明显停止，经常与明显的粒系增生一起发生。常在免疫介导的嗜中性粒细胞减少症动物骨髓涂片中看到。这种“停止”可能在粒细胞成熟的任何阶段出现，但是，经常发生在晚幼粒细胞阶段。免疫介导的破坏动物骨髓细胞的出现，可能类似于粒细胞白血病的动物，但是，免疫介导疾病的那些动物的成熟细胞浓度通常较低，在其他情况下，引起粒细胞成熟发育紊乱包括明显的炎症性疾病（消耗更多成熟形式的细胞）和病毒诱导的嗜中性粒细胞减少症恢复期的动物。

六、巨噬细胞和铁贮存

巨噬细胞（如组织细胞）通常出现的浓度很小（小于1％的有核细胞），红细胞和粒细胞碎屑被巨噬细胞吞噬的现象，偶尔在正常动物骨髓中也能看到。在免疫介导紊乱的动物骨髓中巨噬细胞浓度可以增加，可以观察到被吞噬的包括有核红细胞、血小板和嗜中性粒细胞。增加细胞破坏的其他原因，如药物、毒物、放射线所致的骨髓破坏，也可以导致巨噬细胞增加。在这些情况下，可以看到发生坏死的一些证据，如核固缩、胞浆空泡增加等。在血友病综合症动物中，可以看到巨噬细胞浓度增加显著，这也被称为血友病组织细胞增多症。在继发于感染肿瘤、代谢疾病时，良性组织的细胞增多的情形则罕见。这个综合症至少与两种细胞系的细胞减少症有关，一定要根据成熟红细胞形态，如缺乏、球形、黏着和Coomb’s试验阳性，可与更多常见的免疫介导性疾病区分。

巨噬细胞在血友病综合症动物骨髓中是一个显著的细胞组分，它们表现出正常外形，容易区分，有变形的虫样核胞满、淡蓝色胞浆。许多巨噬细胞观察到胞浆内有被吞噬的造血干细胞，在组织细胞肿瘤性、增生性、恶性组织细胞增多症动物骨髓中，也可看到巨噬细胞浓度的增加。有时能观察到巨噬细胞中血铁质（如铁贮存）的出现或缺乏，必要时用铁的特殊染色如Prussian蓝染色。因为血铁质用Romanowsk染色容易观察到。铁缺乏性贫血动物骨髓的铁贮存减少；炎症性疾病贫血症铁贮存增加。

七、其他细胞

其他细胞类型的出现和百分比，如淋巴细胞和浆细胞，这些细胞也应该被记录。被抗原刺激的动物，浆细胞浓度明显增加。在正常情况下，大约2％或很少的骨髓细胞是浆细胞，在健康动物犬骨髓涂片中观察到的细胞，大约15％或少于15％的细胞可能是淋巴细胞。尽管正常猫高达20％的细胞是淋巴细胞，在骨髓涂片中，浆细胞和淋巴细胞浓度在玻片的不同区域通常也不同。

八、微生物

在骨髓涂片中偶尔发现微生物或罕见细菌，但是可以看到结节型组织胞浆菌病囊、弓形体、科升曼原虫、Cytouxzoon原虫，罕见埃利希氏体。红细胞寄生虫如血巴东虫和巴贝西虫也比较罕见。