色谱分离法在食品分析检验中的广泛应用

食品分析常遇到样品中共存有理化性质十分接近的同分异构体或同系有机化合物。例如，各种氨基酸、维生素等，用其他方法测定时可能会相互干扰，很难用普通的方法排除。此时，可用色谱法分离，预处理后再进行测定。

色谱分离法是将样品中的组分在载体上进行分离的一系列方法，又称色层分离法。该类分离方法效果好，在食品分析检验中广为应用。色谱分离的方法有很多，按流动相的状态可分为气相色谱（GC）和液相色谱（LC），流动相为超临界流体的称为超临界流体色谱（SFC）；按固定相状态分为气固色谱（GSC）、气液色谱（GLC）、液—固色谱（LSC）和液—液色谱（LLC）。按固定相使用的外形和性质可分为柱色谱（CC）、纸色谱（PC）和薄层色谱（TLC）。根据分离原理的不同，还有如下分类。

1.吸附色谱分离

利用固体固定相表面对样品中各组分吸附能力强弱的差异而进行分离分析的色谱法称为吸附色谱。该法使用的载体为聚酰胺、硅胶、硅藻土、氧化铝等吸附剂，经活化处理后具一定的吸附能力。利用吸附剂对不同组分的物理吸附性能的差异进行分离。吸附力相差越大分离效果越好。固定相为固体吸附剂，流动相为气体或液体。如食品中色素的测定，使用聚酰胺做吸附剂，经过滤、洗涤，再用适当的溶剂解吸，得到比较纯净的色素溶液。

2.分配色谱分离

根据各组分在固定相和流动相间分配系数的不同而进行分离分析的色谱法称为分配色谱。当溶剂渗透到固定相中并向上渗展时，分配组分就在两相中进行反复分配，进而分离。固定相一般由固体支持剂（担体）和固定液组成，流动相是气体或液体（与固定相不相溶）。如多糖类样品的纸上层析，样品经酸水解处理，中和后制成试液，滤纸上点样，用苯酚1%氨水饱和溶液展开，苯胺邻苯二酸显色，于105℃加热数分钟，可见不同的色斑：戊醛糖（红棕色）、己醛糖（棕褐色）、己酮糖（淡棕色）、双糖类（黄棕色）。

3.离子交换色谱分离(www.xing528.com)

利用离子交换剂（固定相）对各组分的亲和力的不同而进行分离的色谱法称为离子交换色谱（IEC）。根据被交换离子的电荷可分为阳离子交换和阴离子交换。

阳离子交换：

R—H+M+X-→R—M+HX

R—OH+M+X-→R—X+MOH

该法可用于从样品溶液中分离待测离子，也可从样品溶液中分离干扰组分。分离操作可将样液与离子交换剂一起混合振荡或将样液缓缓通过事先制备好的离子交换柱，则被测离子与交换剂上的H+或OH-发生交换，或被测离子上柱；或干扰组分上柱，从而将其分离。