1.简述吸附柱色谱的分离原理和过程。
●答 吸附柱色谱是利用待分离的混合物中各组分受吸附作用的不同，以及在选定的洗脱剂中的溶解度差异进行分离的。吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大、经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂（即固定相，通常为Al2O3和硅胶），当待分离的混合物溶液流经吸附柱时，各组分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时，由于各组分受吸附的程度和解吸溶解的难易各不相同，经历了反复多次的吸附和解吸溶解之后，各组分在柱中走过的距离就不相同，即：混合物在柱中自上而下按对吸附剂的亲和力大小，分别形成不同层次的“色带”，当每个“色带”从柱底流出时，分别收集每个“色带”，即可得到各组分的溶液，蒸除溶剂后便可得到各纯组分。也可以将柱吸干，挤出吸附剂，按色带分割，分别用溶剂萃取，再各自蒸去溶剂，以获得纯品。
2.影响吸附柱色谱分离效果的因素有哪些？
●答 ①吸附剂的选择；②洗脱剂的选择；③吸附柱的大小；④吸附剂的用量；⑤柱子装填的好坏。
3.装柱是吸附柱色谱中的关键操作，装柱的好坏将直接影响分离效率。装柱应该注意哪些问题？
●答 装柱应注意的问题如下：
（1）柱子应垂直固定在铁架上装填。
（2）柱子应装填均匀、紧密。
（3）柱子不应夹有气泡，更不能出现裂缝或断层。(www.xing528.com)
（4）柱顶表面保持水平。
4.进行柱层析前，要将待分离的样品溶于一定体积的溶剂才能上柱，请问应该怎样选择溶剂？
●答 应根据被分离物中各种成分的极性、溶解度和吸附剂的活性来考虑。溶解样品的溶剂的极性应比样品极性小一些，如果它的极性比样品大，则样品不易被吸附剂吸附。溶剂对样品的溶解度不宜太大，否则也会影响吸附，但如太小，则溶液体积增加使“色带”分散。当有的组分含较多极性基团，在极性小的溶剂中溶解度太小时，可加入少量极性较大的溶剂，这样使溶剂极性增加不大，而又减少了溶液的体积。
5.色谱柱中若有空气泡或装填不匀，为什么会影响分离效果？
●答 若色谱柱中有空气泡或装填不匀，就有可能使柱子出现断层或暗沟，同一组分在柱内下移的速度就不同，容易出现“色带”间交错而影响分离效果。
●答 因为洗脱剂都是有机溶剂，而油脂也是有机物，且易溶于有机溶剂中。若活塞涂上油脂，则当洗脱剂流经此处时会溶解油脂并一同流出柱子于接受瓶中，从而影响分离物质的纯度。
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