细菌DNA转化和克隆成功

下一步就是要把带“蛋白A”基因的重组质粒想办法送到细菌细胞里面去。 送进细菌后，质粒DNA就会被细菌的各种酶系“操来弄去”，扩增起来，“蛋白A”基因也会被转录成mRNA并和细菌的核糖体结合，翻译成“蛋白A”，总之一切就好办了。 因此，把重组质粒导入细菌又是关键性的一步。

我们知道，细菌和哺乳动物细胞的最大差别就是细菌有细胞壁。 细菌细胞壁是一层很厚很坚韧的东西，是蛋白质和多糖的复合物（叫“肽聚糖”）构成的，虽然并不致密，但DNA根本透不过去。 因此，我们要把重组质粒送入细菌体内，必须先把细菌细胞壁剥掉，至少把细胞壁弄出裂缝。科学家在实验实践中发现，氯化钙的稀溶液能把细菌细胞壁剥开，使细菌的细胞质裸露在外面，形成“原生质体”。 这样的原生质体就能吸附质粒DNA，并把它吞入细胞质内，也就是能“感受”外来DNA，所以叫做“感受态”细菌。 因此，只要先用氯化钙的稀溶液处理细菌，就可以顺利地使重组质粒进入细菌体内；这个过程叫做“DNA转化”或“质粒转化”。 然后，经过一系列的使细菌恢复活力的培养处理，体内带有重组质粒的细菌就能大量繁殖，并完成蛋白质合成的全过程。 当然，还有别的方法把质粒送入细菌体内，如电击、基因枪等，我们这里就不多说了。(www.xing528.com)

实际上，这种使重组质粒在细菌体内增殖的技术，主要还是用于科学研究，特别是生命科学的研究。 例如我们可以把想深入研究的一个或多个基因，安装在质粒上，再转入细菌体内，等于把那些基因“保存”在细菌中。 细菌可以在低温下（一般在甘油溶液里，在-70℃低温冰箱中保存）储存几十年不死不坏，因此可以在任何时候把它们重新取出来，培养扩增，提取质粒DNA进行研究，这叫做“分子克隆”。 分子克隆现在是常规生命科学研究实验室的普通技术，每一个生命科学专业的研究生，甚至一部分高年级大学生，都会运用这种技术。