【摘要】:自Christen 等首先报道利用红豆杉细胞培养的方法生产紫杉醇以来,现已从多种红豆杉的外植体诱导出愈伤组织,实验中普遍发现树皮、幼茎等部位较易诱导出愈伤组织。培养基中的糖浓度直接影响细胞干重和紫杉醇产量。通过对细胞营养吸收动力学的研究,发现细胞继代后培养基中葡萄糖和果糖浓度快速上升,一般在继代6~7 d 后达到高峰。采用两相培养、连续培养、固定化细胞培养,使紫杉醇的分离和生产相偶联,有利于提高紫杉醇的产量。
自Christen 等首先报道利用红豆杉细胞培养的方法生产紫杉醇以来,现已从多种红豆杉的外植体诱导出愈伤组织,实验中普遍发现树皮、幼茎等部位较易诱导出愈伤组织。常用的培养基多为改良B5 培养基,它较适于愈伤组织的诱导和以后的培养。
培养基中的糖浓度直接影响细胞干重和紫杉醇产量。通过对细胞营养吸收动力学的研究,发现细胞继代后培养基中葡萄糖和果糖浓度快速上升,一般在继代6~7 d 后达到高峰。由此说明,培养基中的碳水化合物首先水解为果糖和葡萄糖用于吸收,因此,果糖和葡萄糖可能较适于细胞的生长,果糖能促进紫杉醇合成的某一限速步骤。培养基中氮源的还原态和氧化态的相对含量对细胞生长影响很大,Fett-Neto 等认为细胞的生长主要以NO 3- 作为氮源,而高浓度NH4+则会抑制生长。高浓度的NH4 NO3可使细胞生长速率提高1~2 倍。(www.xing528.com)
采用两相培养、连续培养、固定化细胞培养,使紫杉醇的分离和生产相偶联,有利于提高紫杉醇的产量。SekiM.等研究了东北红豆杉固定化细胞和自由细胞悬浮连续培养产紫杉醇的情况,结果表明高的稀释比抑制紫杉细胞生长但显著促进紫杉醇产生。Fett-Neto 等使用玻璃纤维网固定化紫杉细胞,得到紫杉醇含量为干重的0.007%~0.012%。
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