提高紫杉醇产量关键技术

1.改变内生真菌生长的条件

在内生真菌发酵液中加入红豆杉针叶提取物，可以提高紫杉醇的产量。内生真菌脱离植物体后，往往次生代谢停止或延缓，加入红豆杉的提取液，提供产紫杉醇的诱导物，可以启动紫杉醇的合成，从而提高紫杉醇的产量。这些添加物的成分很难确定，而且真菌自生和共生条件下，代谢途径会有所差异，这方面的研究有待深入进行。

2.添加前体物

在真菌发酵液中添加合成紫杉醇的前体物质，可以提高产量。Baccatin Ⅲ、醋酸盐、苯丙氨酸、苯甲酸和亮氨酸等是红豆杉内生真菌产生紫杉醇的有效前体，但是苯甲酸和亮氨酸不是合成紫杉醇的直接前体物质，苯甲酸是产生紫杉醇的最佳激活剂，这又说明红豆杉与内生真菌产生紫杉醇的途径不同。

3.真菌调节剂(www.xing528.com)

寻找一些真菌调节剂，抑制其他的次生代谢途径，可以提高紫杉醇产量。植物体中的生长调节剂对于内生真菌产生紫杉醇有一定的调节作用。氯化氯胆碱对于内生真菌产紫杉醇有抑制作用，而N- 二甲氨基琥珀酸对其有提高产量的作用。

在真菌不同的发酵时期加入不同的糖类，同样可以提高紫杉醇的产量。依据内生真菌的生长条件，根据不同的真菌选择合适的培养基，发现最佳发酵条件。研究不同产紫杉醇真菌的生长条件，以期提高紫杉醇的产量已成为目前重要的研究内容。

4.构建工程菌株

红豆杉与内生真菌之间可能存在一种在两种生物体内遗传交换的分子机制，即基因与基因之间相互交换。内生真菌生存在一个竞争的环境中，红豆杉属的内生真菌可以通过生产和耐受紫杉醇，保证自己的竞争优势。依据紫杉醇与内生真菌之间的相互关系，需要进一步研究产生紫杉醇的基因组、紫杉醇的代谢途径以及相关酶类。对能够产生紫杉醇的内生真菌进行遗传改造，构建高产紫杉醇内生真菌的工程菌株，提高紫杉醇的产量。可以利用各种生物工程技术，如原生质体融合技术、原生质体的诱变与转化等，对内生真菌进行遗传改造。