实验红鲫标准化及应用研究初见成果

1.实验红鲫应用农药化学品环境风险评价

以现行标准推荐的测试方法为模型，如鱼类急性毒性、短期鱼类繁殖试验、鱼类幼体生长试验、鱼类亚慢性毒性试验等，以常见化学品、常见农药为测试对象，与现行标准推荐的测试鱼类进行比较，如、斑马鱼、稀有鲫、剑尾鱼、鲤鱼等，开展靶标（测试鱼）标准化、试验体系选择、敏感性分析、稳定性分析、可重复性分析等，攻破针对实验红鲫优势的方法学上创新的关键技术，建立各测试方法相应的技术参数及标准操作规程。

（1）靶标标准化研究

实验红鲫的标准化是其应用于环境风险评价的重要前提和质量保障。拟从实验红鲫生物学特性研究、品系筛选、实验室标准化养殖方法、环境质量监控等开展测试鱼类（靶标）标准化研究，解决制约环境风险评价的试验条件性技术瓶颈。此部分研究可与第一部分研究相互借鉴。

（2）试验体系选择

选择合适的试验体系是实验红鲫能否用于环境风险评价的基础。拟以重铬酸钾、铜、锌、五氯酚（PCP）等为参比物质，以斑马鱼、稀有鲫、鲤鱼为对照，以静态、半静态或流水式急性毒性试验为试验模型，研究靶标大小、试验方法和试验条件（如暴露条件，水质特征，试验容器，干扰因素等）。(www.xing528.com)

（3）对农药化学品暴露的敏感性试验及其稳定性和可重复分析

农药暴露敏感性是实验红鲫能否成为环境风险评价新的测试鱼类的关键指标。同样，选择重铬酸钾、五氯酚（PCP）、杀虫剂、除草剂等5个以上参比物质，以标准推荐的现行方法（如鱼类急性毒性试验、胚胎-卵黄囊吸收阶段的毒性试验、7d亚慢性毒性试验、短期鱼类繁殖试验、鱼类幼体生长试验等）为试验模型，以现行测试鱼类（如、斑马鱼、剑尾鱼、稀有鲫、鲤鱼等）为对照，以LC50、LD50或EC50研究对参比物质的敏感性、种内及种间敏感性、封闭群和野生群敏感性、不同性别敏感性、对不同生命阶段的敏感性等。再通过大量平行、不同批次、不同人员和不同实验室的多次重复试验，分析实验红鲫对农药暴露敏感性试验的稳定性和可重复性，建立相应技术参数和实验红鲫的毒性试验方法。综合分析试验结果，建立相应技术参数，撰写综合试验报告；以测试试验的要求和标准，建立标准化实验红鲫实验室，编制实验红鲫的毒性测试方法，并制定其相应标准操作规程，编制并报送国家有关部委推荐作为国家标准修订时拟引用的农药化学品毒性测试新方法，或编制湖南省地方标准（送审稿）。

2.实验红鲫应用于石油勘探开发污染物环境风险评价

拟以现行国家标准推荐的石油勘探开发污染物环境风险评价生物毒性测试方法（如幼鱼急性毒性试验、血细胞完整性试验、生物富集与降解试验等）为试验模型，一方面以现行测试鱼类（如斑马鱼、虾虎鱼、剑尾鱼等）作对照，研究污染物对测试鱼类血液生理生化、细胞毒性、遗传毒性（DNA损伤）、酶活性等的影响，筛选相关敏感性指标，再针对实验红鲫的敏感性优势，创新试验方法；另一方面，根据实验红鲫的生物学特性，如体形大小合适、活体取血达2mL等，比较现行测试鱼类（如斑马鱼、虾虎鱼、剑尾鱼等）在生物富集、代谢释放、组织病理学、生活周期动态检测等方面的相对优势，创新实验红鲫检测新方法，再经过多批次重复试验，针对性别、个体差异以及环境因素对试验的影响，开展室内标准化质量控制研究。建立相关技术参数，建立基于实验红鲫的石油勘探开发污染物环境评价测试方法，编制基于实验红鲫测试的石油勘探开发污染物毒性检测技术标准（送审稿）。