纳米粒子释放行为研究：纳米粒子在培养基中的释放行为

为了检验不同类型的ZnO－的溶解多糖纳米复合物在细胞培养基中的浓度，使用电感耦合等离子体－质谱法（ICP－MS）定量检测ZnO－多糖纳米复合物释放的锌离子浓度。首先，将浓度不同的ZnO－多糖纳米复合物分别溶于A549和SH－SY5Y两种细胞的培养基中（表7.1），置于培养箱中（37℃，5%CO₂），孵育24h。然后等分试样（1mL）取出，离心（15000g，20min），上清液引入微量石英采样管，使用10%硝酸消化样品。上样检测Zn²⁺浓度，检测仪器为（PerkinElmer Elan 6000），仪器检测限为0.02μg/mL。

表7.1 不同的ZnO—多糖纳米复合物在A549和SH－SY5Y细胞培养基中释放的锌离子浓度

注：结果为三次实验平均值±SD。(www.xing528.com)

如图7.5所示PS2－ZnO（来自Lentinus tigrinus）和PS10－ZnO（来自银杏多孔菌）对A549细胞的毒性明显较低。其毒性的差异可能是这两种ZnO多糖复合物在其细胞培养基中释放的游离Zn²⁺较少所导致（ICP－MS测量结果如表7.1所示）。值得注意的是锌粒子在A549细胞培养基中的释放浓度相对高于SHSY5Y细胞培养基，特别是在较高的剂量下。在任何情况下，PS10－ZnO在两者中都表现出最低的锌粒子释放浓度，而P S1－ZnO和P S5－ZnO在高浓度下分别在A549和SH－SY5Y细胞培养基中均释放出较多的锌离子。这些Zn²⁺释放值与可能与纳米复合物中的C含量相关，具有P S10－ZnO和P S2－ZnO（较高的C含量）表现出前所未有的低毒性可能与这些材料中Zn²⁺释放减少有关（表4）。Zn²⁺浓度的增加可以相关降低细胞活力（增加毒性）。Zn是很多酶（如乙醇脱氢酶，基质金属蛋白酶）和转录因子（如锌指蛋白）转录因子重要组成成分。因此，细胞锌粒子浓度的体内平衡被破坏会导致细胞毒性。过高的锌离子浓度可能会导致细胞内氧化应激，进而导致细胞凋亡。