常用厌氧培养方法及其特点

厌氧细菌由于对氧敏感，在其分离鉴定过程中均需在无氧的环境培养，否则就不能生长甚至死亡。就此，人们创造了许多厌氧培养方法，目前常用的厌氧培养方法有厌氧罐法、气袋法及厌氧箱培养法三种。

1.厌氧罐法(适用于一般实验室，特点是较经济并迅速建立厌氧环境)

将接种好的平板放入厌氧罐(图Ⅶ－3)，拧紧盖子。用真空泵抽出罐内空气，使压力真空表至－79.98 kPa停止抽气，充入高纯氮气使压力真空表指针回0位，连续反复3次。在罐内－79.98 kPa情况下，充入70% N2、20% H2、10% CO2。厌氧罐内需放入冷催化剂钯粒，催化罐中残余O2和H2化合成水。同时罐中应放有美蓝指示管。

注:美蓝有氧环境下呈蓝色，无氧时红色，临用前先将美蓝煮沸使其变成无色，放入罐内美蓝先呈浅蓝色，待罐内无氧环境形成时，美蓝即持续无色。

2.气袋法

此种方法需要特殊设备，操作简单，使用方便，不仅实验室采用，而且外出采样、现场接种也可采用。原理是采用塑料袋代替了厌氧罐，气袋透明而密闭。内装有气体发生安瓿，指示剂安瓿，含有催化剂带孔塑料管各1支。(www.xing528.com)

图Ⅶ－3　厌氧罐

(图片选自网络)

操作方法:首先接种平板培养基放入袋中，用弹簧夹夹紧袋口，用手指压碎气体安瓿，20 min再压碎指示剂安瓿，指示剂变蓝色，说明袋内达厌氧状态，即放入37℃培养箱中进行培养。

3.厌氧箱培养法

使用之前必须仔细检查厌氧装备有无漏气及催化剂、指示剂质量等问题。使用时严格遵守操作规程，保证箱内气体比例合理。