斜面接种法：纯种细菌培养与保存方法

斜面接种是从已生长好的菌种斜面上挑取少量菌苔转接至另一新鲜斜面培养基上，目的是扩大纯种细菌及实验室保存菌种。斜面接种的方法(图Ⅵ－6)，包括以下几种方法。

1.点种法

以无菌操作法用接种环挑取少量菌苔，点种在斜面培养基的中下部，此法常用于霉菌孢子的接种，也可用于暂时保存菌种。

2.直线接种法

以无菌操作法用接种环挑取少量菌苔于斜面底部，至下向上划一条直线，用于观察菌体培养特征。

3.曲线接种法

以无菌操作法用接种环挑取少量菌苔于斜面底部，至下向上划一条直线，再自下而上轻轻来回作蜿蜒划线，或直接自斜面底部向上蜿蜒划线。此法能充分利用斜面，获得大量菌体细胞，是进行菌种保存时常用的接种方法。

微生物接种操作注意事项:

在进行微生物培养过程中，标本的采集或培养操作等均须严格执行无菌操作技术。(www.xing528.com)

(1)所有用具，培养基等必须严格灭菌，使用过程中不得与外界未经灭菌物品接触，如已接触应立即换用。切忌长时暴露于空气中，有盖的应迅速盖上。

(2)整个操作过程均须在无菌室、超净工作台或接种罩内进行。

图Ⅵ－6　斜面培养基接种法

(图片选自网络)

(3)灭菌的试管、摇瓶在打开盖后关闭前，口部应在火焰上通过1～2次，以杀灭可能从空气中落入的杂菌。

(4)接种环或接种针于每次使用前，均应在火焰上彻底烧灼灭菌，金属棒或玻璃棒部分亦须转动着通过火焰3次。

(5)皮肤表面及口腔常存在大量杂菌，故在操作过程中切忌用手接触标本及已灭菌的器材内部，也勿用口吹。

(6)打开瓶塞及试管塞时，应将棉塞或试管帽上端夹持于手指间适当位置，不得将棉塞或瓶塞任意放置别处。