干热灭菌方法：干热空气灭菌的原理和操作步骤

1.火焰灼烧灭菌

微生物接种用的接种环、接种针、玻璃涂布棒和其他金属用具以及试管口或三角瓶口、吸管等，可直接通过酒精灯的火焰灼烧至红热进行灭菌。此法灭菌迅速、彻底。烧灼灭菌的方法见图Ⅳ－1。

图Ⅳ－1　灼烧灭菌的方法

2.干热空气灭菌

干热空气灭菌主要是利用电热恒温干燥箱，通过高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。无水条件下，160℃才能使微生物细胞蛋白质凝固，所以进行干热灭菌时，应加热到160～170℃，维持1～2 h才能达到完全灭菌。与湿热灭菌相比，干热灭菌所需的温度高，时间长。

干热空气灭菌所使用的电热恒温干燥箱有普通式和鼓风式两种。实验室常用的一般为鼓风式干燥箱(图Ⅳ－2)。鼓风式干燥箱可以加快热空气的对流，使箱内温度均匀，同时使箱内物品蒸发的水蒸气加速散逸到箱外的空气中，以提高干燥效率。适用于干热空气灭菌的物品有:玻璃器皿(培养皿、试管、吸管等)和药物干粉等。

图Ⅳ－2　鼓风式干燥箱

灭菌步骤:

①装箱:待灭菌的玻璃器皿、试管、吸管等必须洗净并干燥、包装后才能放入干燥箱进行灭菌。需要注意的是，放入箱内灭菌的器皿不宜放得过挤，一般不超过总容量的65%，而且不得使器皿与烘箱底板直接接触。

②升温:待灭菌的物品摆放妥当之后，关好干燥箱门，插上电源插头，打开开关，旋动恒温调节器至红灯亮，让温度逐渐上升。若红灯熄灭绿灯亮，表示箱内已停止加温，如果此时温度还未达到所需的160～170℃，则需转动调节器使红灯再亮，如此反复调节，使温度达到所需温度值。(www.xing528.com)

③恒温:当温度达到160～170℃时，保持此温度2 h。

④降温:灭菌完毕，不能立即开门取物，须关闭电源，待温度自动下降至50℃以下再开门取物。

恒温干燥箱干热空气灭菌的注意事项:

(1)箱内物品不能放得太满，且不能与箱内壁铁皮和烘箱底板直接接触，以免包器皿的包装被烤焦甚至着火。

(2)升温或有水分需要迅速蒸发时，可打开干燥箱的进气孔和排气孔，待温度升至160～170℃时，将进气孔和排气孔关闭，使箱内温度一致。

(3)灭菌温度要控制在170℃以下。若发生箱内烤焦或燃烧事故时，应先关闭电源及进气孔、排气孔，待温度降至60℃以下时，才能打开箱门进行处理。未切断电源前切勿打开进气孔和排气孔，以免促使燃烧造成更大损失。

(4)灭菌完毕，须关闭电源，待降温自动下降至50℃以下再开门取物，以免因温度骤降导致玻璃爆裂。

(5)用于干热空气灭菌玻璃器皿时，温度为120℃左右，持续30 min，并打开排气孔以利于水蒸气散出。