案例导入
案例：2011年年初，李某安在家中使用非食用化工染料“腊红”、“碱性橙”等，对玉米皮、成色差的辣椒进行染色、晒干，再混合碾碎，生产出一批辣椒粉。李某安将这批辣椒粉装在袋子里，运到晋江。3月28日，他将辣椒粉运往内坑镇白垵村东大街贩卖时，被晋江市工商行政管理局查获。工商部门缴获30袋辣椒粉，共计1200千克。经鉴定，这批辣椒粉含有苏丹红Ⅳ等有毒、有害物质。据悉，国际癌症研究机构将苏丹红Ⅳ列为三类致癌物。案发后，公安机关还从李某安的住处扣押一只装有少量红色粉末（经鉴定，被检测出苏丹红Ⅳ）的塑料桶、345克疑似添加染料色素的辣椒粉（经鉴定，被检测出含有苏丹红Ⅳ等物质）一袋、255克绿色疑似染料色素（经鉴定，被检测出罗丹明B）—袋。
讨论：1.苏丹红是什么物质？2.在检测过程中是否会存在假阳性的问题？
正常辣椒粉应是红色或红黄色油润而均匀的粉末，是由红辣椒，黄辣椒，辣椒籽及部分辣椒杆碾细而成的混合物，具有辣椒固有的辣香味。然而一些不法商家为了使辣椒粉看起来更加鲜红诱人，添加苏丹红属于非法行为。
苏丹红是一种化学染色剂，并非食品添加剂。它的化学成分中含有一种叫萘的化合物，该物质具有偶氮结构，这种化学结构的性质决定了它具有致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。由于其染色鲜艳，一些不法商贩在加工辣椒粉的过程中添加苏丹红，给消费者的身体健康带来危害。
1.原理
本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的苏丹红I与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化，通过榜测线（T线）与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中苏丹红I进行定性判定。
2.试剂
乙腈、无水硫酸镁、正己烷、二氯甲烷、氢氧化钠、无水乙醇、苏丹红。
①氢氧化钠溶液（2 mol/L）：称取氢氧化钠8 g，用水溶解并稀释至100 mL。
②复溶液：将无水乙醇与水按照体积比25：75混勻。
③苏丹红对照品I,CAS登录号842-07-9，分子式C 16H12N2O。
④苏丹红I标准储备液（1 mg/mL）：精密称取苏丹红I参考物质适量，置于10 mL容量瓶中，加入适量乙腈超声溶解后，用乙腈稀释至刻度，摇勻，制成浓度为1 mg/mL的苏丹红I标准储备液。-20℃避光保存，有效期6个月。
⑤苏丹红I标准中间液（1 μg/mL）：精密量取苏丹红I标准储备液（1 mg/mL）100 μL，置于100 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇勻，制成浓度为1 μg/mL的苏丹红I标准中间液。
3.仪器及材料
①固相萃取柱：CNW Poly-sery MIP-SDR固相萃取柱（200 mg/3 mL）。(www.xing528.com)
②移液器：200 μL、1 mL和5 mL。
③涡旋混合器。
④离心机，转速≥4000 r/min。
⑤电子天平：感量为0.01 g。
⑥氮吹仪。
⑦水浴锅。
4.检测方法
（1）样品的测定
称取辣椒粉3 g（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入8 mL乙腈提取，涡旋振荡1 min后，6000 r/min离心5 min。转移上清液于10 mL离心管中，吹干后加入2 mL氢氧化钠溶液，涡旋混勻30s后置于80℃水浴皂化5 min。再加入2 mL正己烷，涡旋萃取30 s后，6000 r/min离心5 min，转移上清液于新的10 mL离心管中，加入无水硫酸镁0.5 g，涡旋振荡30 s后，4000 r/min离心5 min，转移上清液于10 mL离心管中吹干。精密加入400 μL复溶液，祸旋混合1 min，作为待测液，立即测定。
吸取200 μL待测液于金标微孔中，抽吸5～10次使混合均匀，室温温育3～5 min，将金标微孔中全部溶液滴加到检测卡的加样孔中，温育5～8 min，进行结果判定。
（2）结果判定
通过对比质控线（C线）和检测线（T线）的颜色深浅进行结果判定。目视判定示意图见图9-3。
图9-3 目视判定示意图
5.注意事项
环境条件：温度15〜35℃，湿度≤80%。
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