火锅底料中吗啡、可待因快速检测

案例导入

案例：2018年12月，《消费者报道》整理了国家及省级食品药品监督管理局近5年来关于火锅底料的质量抽检报告。结果显示国家及省级食药监共抽检出23批次不合格的火锅底料，不合格的主要原因是检出罂粟壳成分，如那可丁、罂粟碱、吗啡、可待因、蒂巴因等。从省份来看，四川成为不合格火锅底料的重灾区，占不合格比例的43.5%。餐饮经营者在火锅中使用罂粟壳，主要用于招揽回头客。为了掩人耳目，这些不法商家一般不会将完整的罂粟壳加入到火锅，而是将罂粟壳或籽磨成粉末或制成水浸物混入到火锅底料等食物中，食客亦难以发觉。

讨论：1.火锅底料中吗啡、可待因的快速检测的方法有哪些？2.在检测过程中应注意哪些问题？

为改善火锅口味，一些餐馆在自行配制调味料时添加吗啡、可待因、工业石蜡等物质，且存在超范围、超量使用食品添加剂的现象。吗啡、可待因是一类鸦片类药物，用于剧烈疼痛，也用于麻醉前给药，使用后会产生欣快感，常用成瘾。在火锅底料中添加吗啡、可待因等毒品属于非法行为。

1.范围

本方法适用于经调味料、火锅底料、麻辣烫底料或其他食用汤料等勾兑、调配或添加形成的液体食品；经调味酱、调味油脂、火锅底料、麻辣烫底料、蘸料或其他调味料等勾兑、调配或添加形成的半固体食品；经香辛香料、复合调味料等勾兑、调配或添加形成的固体食品中吗啡、可待因的快速测定。

2.原理

本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的吗啡、可待因经水提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测线（T线）上抗原的结合，导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中吗啡、可待因进行定性判定。

3.检测卡

由试纸条及配套卡壳组装而成（见图9-1）。其中，试纸条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜（NC膜）和吸水纸构成。将特异性的抗原或抗体以条带状固定在硝酸纤维素膜（NC膜）上，胶体金标记试剂（多克隆抗体或单克隆抗体）吸附在金标垫或金标微孔中，当加入待检样本后，样本溶解金标垫上或金标微孔中的胶体金标记试剂并与之相互反应，通过毛细作用向前，移动至固定抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚焦在测试线（T线）上，可通过目测观察到显色结果。

4.试剂

甲醇、乙醇、吗啡、可待因。

①吗啡、可待因标准储备液（1 mg/mL）：分别精密称取适量吗啡、可待因参考物质，用甲醇溶解，并稀释成浓度为1 mg/mL的吗啡、可待因标准储备液。-20℃避光保存，有效期1年。

②吗啡、可待因标准中间液（10 μg/mL）：精密移取吗啡、可待因标准储备液（1 mg/mL）1 mL分别置于100 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成浓度为10 μg/mL的吗啡、可待因标准中间液。-20℃避光保存，有效期3个月。

③吗啡、可待因标准工作液（1 μg/mL）：精密移取吗啡、可待因标准中间液（10 μg/mL）1 mL分别置于10 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1 μg/mL的吗啡、可待因标准工作液。4℃避光保存，有效期1个月。

图9-1　检测卡亦意图

5.检测方法

（1）试样溶液的测定

液体样品：当试样较清澈时，可直接吸取一定量试样（尽量避免吸取油脂层）直接进行测定；如试样较黏稠，测定时层析展不开，可用0.45μm微孔滤膜过滤后，再进行测定。(www.xing528.com)

半固体食品：准确称取试样（1±0.1）g于15 mL具塞离心管中，加2～3 mL水，大力振摇至均匀（必要时置约70℃水浴加热），静置5～10 min，吸取水层（尽量避免吸取油脂层或沉淀）测定。层析展不开时，用0.45μm微孔滤膜过滤后测定。

固体食品：准确称取试样（1±0.1）g于15 mL具塞离心管中，加8～10 mL水，大力振摇1～2 min至均勻，静置5～10 min，吸取水层测定。层析展不开时，用0.45μm微孔滤膜过滤后测定。

（2）试验步骤

将未开封的检测卡在室内放置不少于30 min，将检测卡膜面朝上平放，用滴管吸取3～4滴（约80 μL）待测液滴加到检测卡的加样孔中，在规定时间条件下，观测检测卡质控线（C线）和检测线（T线）。

6.结果判定

使用比色法，结果判定如图9-2所示。

（1）无效

质控线（C线）不显色，无论检测线（T线）是否显色，表示操作不正确或检测卡已失效。

（2）阴性结果

质控线（C线）显色，检测线（T线）颜色比质控线（C线）颜色深或检测线（T线）颜色与质控线（C线）颜色相当，均表示样品中不含吗啡、可待因或含量低于方法检测限，判为阴性。

（3）阳性结果

质控线（C线）显色，检测线（T线）颜色比质控线（C线）颜色明显浅或检测线（T线）不显色，均表示样品中吗啡、可待因含量高于方法检测限，判为阳性。

图9-2　目视判定示意图（比色法）

7.注意事项

①工作环境：温度15～30℃，操作时避免阳光直射。

②检测卡在37℃下放置60 d，或者50℃下放置25 d。

③不要用手触摸试纸反应区，每条试纸限用一次。