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荧光猝灭法选择性测定全血样品血红蛋白

时间:2023-11-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:而以离子液体BBimPF6为荧光探针,采用荧光猝灭法测定血红蛋白时,白蛋白、转铁蛋白、细胞色素C等蛋白质对离子液体的荧光均无影响,因此可采用以离子液体BBimPF6为荧光探针所建立的荧光猝灭法选择性地测定全血样品中的血红蛋白。与吸收光谱法相比,本法无需对血液进行预处理即可选择性地测定血液中的血红蛋白。

荧光猝灭法选择性测定全血样品血红蛋白

在人全血样品中存在着血红蛋白、白蛋白、转铁蛋白、细胞色素C等多种蛋白质,采用吸收光谱法测定人血液中血红蛋白浓度时,白蛋白、转铁蛋白等蛋白质在280nm处有明显吸收,而细胞色素中血红素分子在406nm处也有明显光吸收。因此,在不对血液样品进行预处理时,以上蛋白质的存在会干扰血红蛋白的测定而引入一定的误差。而以离子液体BBimPF6荧光探针,采用荧光猝灭法测定血红蛋白时,白蛋白、转铁蛋白、细胞色素C等蛋白质对离子液体的荧光均无影响,因此可采用以离子液体BBimPF6为荧光探针所建立的荧光猝灭法选择性地测定全血样品中的血红蛋白。

实验中对全血样品稀释液中血红蛋白浓度进行了两次测定,具体操作为,用二次去离子水将人全血样品稀释100倍,取稀释后的全血样品10μL加入3mL离子液体BBimPF6饱和水溶液中,测定荧光强度,根据血红蛋白标准曲线计算出10μL稀释后的全血样品中血红蛋白的浓度,并进行了加标回收实验,结果如表6-2所示。

从实验结果可以看出,以离子液体BBimPF6为荧光探针,采用荧光猝灭法可实现对全血中血红蛋白的选择性测定。与吸收光谱法相比,本法无需对血液进行预处理即可选择性地测定血液中的血红蛋白。(www.xing528.com)

表6-2 荧光猝灭法测定人全血样品中血红蛋白结果

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