【摘要】：对于体积为3mL，浓度为100ng/μL的血红蛋白标准溶液，当离子液体体积为400μL，萃取时间为30min，溶液pH为6.7时，血红蛋白的萃取率在95%以上。采用0.6%的SDS作为反萃取剂，可将离子液体中的血红蛋白反萃取到水溶液中，对于20ng/μL的血红蛋白，反萃取率约为85%。SDS-PAGE凝胶电泳测定结果表明，采用离子液体可以实现对全血中血红蛋白的分离。在萃取过程中，无需添加任何有机溶剂或辅助萃取剂，在室温下即可实现对血红蛋白的萃取。
本章对离子液体1-丁基-3-三甲基硅咪唑六氟磷酸盐（BtmsimPF6）萃取分离血红蛋白进行了研究，结果表明，无需添加其他任何辅助萃取剂，血红蛋白可以从水溶液被萃取到离子液体中，而其他蛋白质（白蛋白、转铁蛋白、细胞色素C等）不能被直接萃取。基于此，可建立一种离子液体萃取分离血红蛋白的方法。
（1）萃取条件及结果。对于体积为3mL，浓度为100ng/μL的血红蛋白标准溶液，当离子液体体积为400μL，萃取时间为30min，溶液pH为6.7时，血红蛋白的萃取率在95%以上。采用0.6%的SDS作为反萃取剂，可将离子液体中的血红蛋白反萃取到水溶液中，对于20ng/μL的血红蛋白，反萃取率约为85%。
（2）萃取机理。血红蛋白中血红素分子的铁原子与离子液体中的咪唑阳离子发生配位作用，离子液体的咪唑氮原子与血红素中铁原子发生轨道杂化，垂直于血红素分子平面与铁原子发生配位，从而将血红蛋白萃取到离子液体中。
（3）实际血样中血红蛋白的萃取分离。SDS-PAGE凝胶电泳测定结果表明，采用离子液体可以实现对全血中血红蛋白的分离。(www.xing528.com)
（4）该方法的优点。在萃取过程中，无需添加任何有机溶剂或辅助萃取剂，在室温下即可实现对血红蛋白的萃取。
（5）该方法的不足。反萃取过程中使用的反萃取剂为SDS，因此，在反萃取后的血红蛋白溶液中含有大量SDS，对其后续应用可能会有一定限制。
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