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离子液体在核酸和蛋白质分离中的应用研究成果

时间:2023-11-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:EB分子的共振光散射研究表明,无论在水溶液还是离子液体中,EB分子的共振光散射强度均随EB浓度增大而降低。实际血样中DNA的测定结果表明,该方法能够准确地定量实际血样中的DNA浓度,与测定水溶液中获得的结果相吻合。体系的共振光强度变化幅度小,相对误差较大;同时,由于体系中离子液体阳离子的电荷屏蔽作用,使EB与DNA的静电作用减弱,其共振光变化不显著,使其线性范围较小。

离子液体在核酸和蛋白质分离中的应用研究成果

本章在前一章节离子液体萃取DNA的基础上,建立了离子液体中DNA含量的直接定量分析方法。

(1)对EB—DNA体系的共振光散射进行了研究,结果表明,水溶液中的EB—DNA体系的共振光散射强度随着DNA浓度的增大而显著增强;当DNA被萃取到离子液体中后,EB—DNA体系的共振光强度随着DNA浓度增大而明显降低。据此,建立了直接定量离子液体相中DNA浓度的共振光散射方法。

(2)作用机理研究表明,在水溶液中,EB分子插入DNA的双螺旋结构中,发生键合反应作用,导致游离的EB分子浓度降低;当DNA被萃取到离子液体中后,EB分子不能够插入DNA的双螺旋结构中,EB与DNA仅发生静电相互作用,导致EB在DNA表面发生浓集,使EB浓度在局部增大。

(3)EB分子的共振光散射研究表明,无论在水溶液还是离子液体中,EB分子的共振光散射强度均随EB浓度增大而降低。其原因主要是由于EB分子在480~530nm波长范围内有明显的光散射与光吸收,即EB分子自身同时存在荧光团和吸收团,荧光团发射的散射光(480~530nm)被吸收团所吸收,导致了内滤效应的产生,最终引起EB的共振光强度随着EB浓度的增大而降低。(www.xing528.com)

(4)实际血样中DNA的测定结果表明,该方法能够准确地定量实际血样中的DNA浓度,与测定水溶液中获得的结果相吻合。

(5)该方法的优点。常规测定DNA方法都是在水溶液中进行,离子液体的存在对其荧光有猝灭作用,无法测定;本方法在离子液体中仍可以对DNA进行准确测定。采用该方法,解决了上一章离子液体中DNA浓度的直接测定问题。

(6)该方法的不足。体系的共振光强度变化幅度小,相对误差较大;同时,由于体系中离子液体阳离子的电荷屏蔽作用,使EB与DNA的静电作用减弱,其共振光变化不显著,使其线性范围较小。

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