一般来说，共振光散射的产生是由于分子吸收一定波长的激发光，从基态跃迁到激发态后，激发态的分子在返回基态的过程中发射出与激发波长相同的散射光，其散射强度会显著增大。然而，本实验发现DNA—EB体系的共振光散射强度随DNA浓度增大而明显降低，这个现象与在水溶液中是完全相反的。为了解释这个现象，实验中分别对不同DNA浓度下DNA—EB体系在水相与离子液体相中的吸收光谱进行了考察，结果如图3-2所示。
如图3-2（a）所示，在水溶液中随DNA浓度增大，EB的最大吸收波长发生明显红移。其原因是在水溶液中当EB分子与双螺旋DNA接触时，EB分子嵌入DNA双螺旋结构的碱基对孔穴中[25]，EB与DNA发生键合反应有新的化学键产生，因此最大吸收波长发生改变；同时，随DNA浓度增大，EB在波长430～530nm范围内吸光度明显降低，这主要是由于DNA浓度增大，与DNA发生键合反应的EB分子也增多，从而导致水溶液中游离的EB分子浓度降低。
图3-2 DNA—EB体系的吸收光光谱
（a）水相：DNA浓度为0～5.0ng/μL，EB浓度为10ng/μL。
（b）DNA萃取进入IL相：DNA浓度为0～15ng/μL，体积为200μL；EB浓度为2.0μg/μL，体积为10μL；IL体积为100μL；乙腈体积为1000～1900μL；萃取时间为30min。(www.xing528.com)
从图3-2（b）可以看出，在离子液体相中，随DNA浓度增大，EB在470～540nm范围内的吸光度增大，这表明溶液中游离的EB浓度增大。这主要是由于在离子液体相中，离子液体的Bmim+与DNA首先发生结合反应[26]，Bmim+插入DNA双螺旋结构中，从而阻止了EB分子与DNA的嵌入反应，EB分子只能通过静电吸引作用在DNA表面发生聚集，从而使溶液中EB浓度在局部浓集，导致其吸光度增大。从图中还可以看出，随着DNA浓度的增大，EB分子的最大吸收波长没有发生变化，这表明在离子液体相中EB分子没有嵌入DNA双螺旋结构中而与DNA发生键合反应。
通过对DNA—EB体系的吸收光谱的研究，认为EB分子与DNA的结合方式在水相与离子液体相中是完全不同的。在水溶液中EB插入DNA的双螺旋结构中与DNA发生键合反应，从而使游离的EB分子浓度降低；而在离子液体相中，EB分子与DNA没有发生键合反应反应，仅通过静电吸引作用在DNA表面聚集，从而导致EB在局部发生浓集。其结合示意如图3-3所示。
图3-3 在水相和离子液体相（IL）中DNA与EB的结合方式示意图
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