离子液体在DNA-EB的共振光谱中的应用

EB（溴化乙锭）作为一种常见的荧光染料，常用来作为DNA定量测定的荧光探针，DNA的存在可显著增强EB的荧光，且荧光强度与DNA的量在一定范围内呈线性[25]。一方面，当DNA被萃取到离子液体中后，离子液体会显著地猝灭EB的荧光，因此，采用荧光法无法直接测定离子液体中的DNA。从另一方面来考虑，离子液体猝灭DNA—EB体系的荧光，表明其对DNA—EB体系有影响。对荧光光谱的研究发现，DNA—EB体系在510nm波长激发下的共振光散射强度随着DNA浓度而发生有规律的变化。图3-1为DNA—EB体系的共振光散射光谱。在水溶液中，DNA—EB体系的共振光强度随DNA浓度增大而明显增大，且在一定DNA浓度范围内呈线性关系[图3-1（a）]；在离子液体相中，即当DNA被萃取到离子液体中后，随着DNA浓度的增大，DNA—EB体系的共振光强度并没有增加，反而下降，且在一定DNA浓度范围内也呈良好的线性关系[图3-1（b）]。因此，基于在离子液体相中EB与DNA体系的共振光散射光谱，建立了直接定量离子液体相中DNA的新方法。在最佳实验条件下，测得EB—DNA体系的共振散射光强度（I）随DNA浓度（CDNA）变化的线性方程为：I=-6.123 CDNA+18.524，R2=0.9964，线性范围0.2～0.8ng/μL，检出限为0.05ng/μL。

图3-1　DNA—EB体系的共振光散射光谱(www.xing528.com)

（a）水相：DNA浓度为0～5.0ng/μL；EB浓度为10ng/μL。
（b）DNA萃取进入IL相：DNA浓度为0～0.8ng/μL，体积为200μL；EB浓度为2.0μg/μL，体积为10μL；IL体积为100μL；乙腈体积为1000～1900μL；萃取时间为30min。