Wnt经典信号对自噬相关基因的表达调控

自噬过程中参与的基因较多，仅目前发现的自噬相关蛋白就有30 多种，这些蛋白通过相互作用会形成不同的复合物，这些复合物包括Atg5、Atg7 和Atg12 等，通常被称为“核心”Atg 蛋白复合物，它们在自噬形成的开始及自噬体膜形成的过程中至关重要。自噬体的组装和形成被认为是自噬发生最重要的环节，所以参与自噬体膜形成的各类蛋白就作为了检测细胞自噬发生水平的又一指标。分别激活和阻断Wnt 经典信号后，我们通过检测LC3、Atg5、Atg7、Atg12 的mRNA 水平（图7-8）。从而判断Wnt 经典信号对BCG 感染后巨噬细胞发生自噬的影响，结果表明，Wnt 经典信号下调BCG 感染后巨噬内细胞LC3、Atg5、Atg7 和Atg12 的mRNA 表达量。

图7-8　Wnt 经典信号对BCG 感染后巨噬细胞自噬相关蛋白mRNA 表达水平的影响(www.xing528.com)

除此之外，作为一种参与泛素化底物的重要蛋白P62 通常绑定待降解的目标蛋白，形成多聚泛素化蛋白，将待降解物带入自噬体中，所以P62 蛋白的出现意味着自噬体内包裹物质被降解。因此，当P62 表达增加意味着自噬可能被抑制，而自噬被激活则P62 降解增加，也就是P62 表达量会减少，一般情况下，可以通过P62 蛋白的表达和LC3Ⅱ/Ⅰ转化情况来判断自噬流的状态。根据我们的研究结果可以看出，Wnt 经典信号上调了P62 的mRNA 表达量。

既然自噬是细胞维持自身稳态的一种机制，而且在细胞抗胞内细菌和病毒感染中发挥着天然免疫应答的作用。根据我们的研究结果，我们发现BCG 感染后，巨噬细胞的自噬率明显上升，细胞内部出现自噬体，且增强细胞内的自噬流。当激活Wnt 经典信号通路后，抑制由BCG 激活的自噬作用，Wnt3a 减少被BCG 感染的巨噬细胞的自噬率，减少细胞内自噬溶酶体个数，并且减弱细胞内自噬流。而当向细胞内转染Wnt 经典信号抑制剂DKK1 后，有效阻断了Wnt 经典信号通路，阻断通路后Wnt3a 对于被BCG 感染的巨噬细胞自噬的抑制情况得到缓解，自噬溶酶体个数增加，且自噬流强度增强。由此我们可以看出，细胞自噬对于结核分枝杆菌有清除作用，即结核分枝杆菌会诱导巨噬细胞自噬。