Wnt经典信号调控PARP-1和AIF表达

在细胞生命活动中存在很多种蛋白修饰，比如，甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化等，还有一种蛋白修饰是由PARP 介导的翻译后蛋白修饰，称为聚ADP 核糖（PAR）化，聚ADP 核糖化主要是由PARP 家族催化引发的，应答DNA 损伤的只有PARP-1 和PARP-2 两个成员。PARP-1 是一种富含在细胞核中的酶，DNA 损伤能引起其高度活化，利用NAD+作为供体转移多聚ADP 核糖（PAR）到受体蛋白。当ROS 积聚或DNA 损伤等刺激后PARP-1 被过度激活，导致快速消耗NAD+，进而消耗ATP，造成细胞功能失调和坏死，PARP-1 在维持基因组完整性和控制细胞周期方面具有重要作用。

由图6-14、6-15 可知，激活Wnt 经典信号通路后，BCG 感染或未感染的小鼠巨噬细胞RAW264.7 中的PARP-1 蛋白表达量均下调，而且利用PARP-1 的抑制剂3-AB 处理后的细胞PARP-1 表达量均低于没用3-AB 处理的细胞，而PARP-1 的下游蛋白AIF 也呈现同样的趋势，这表明激活Wnt经典信号通路可以抑制小鼠巨噬细胞PARP-1 和AIF 的蛋白表达，Sosna 等2013年报道，TNF-α 增加经RIP3 诱导的细胞凋亡途径与PARP-1 参与的凋亡途径是两条完全不相同的通路，由此可见，PARP-1 与Wnt 经典信号对BCG 感染后细胞的坏死调控有关，而RIP3 可能只是与BCG 感染后巨噬细胞凋亡相关。

图6-14　Wnt 经典信号对BCG 感染后巨噬细胞PARP-1 及AIF 蛋白水平的影响(www.xing528.com)

图6-15　Wnt 经典信号对H2O2 处理后巨噬细胞PARP-1 及AIF 蛋白水平的影响

为了更进一步验证Wnt 经典信号对PARP-1 诱导坏死的调控作用，通过用H2O2 来处理小鼠RAW264.7 细胞，同时激活Wnt 经典信号通路，通过检测PARP-1 和AIF 的表达，结果表明，Wnt3a 显著降低了H2O2 处理后巨噬细胞的PARP-1 和AIF 的蛋白表达量，同时，PARP-1 的抑制剂3-AB 则下调了H2O2 处理后细胞的PARP-1 的含量。这与Wnt 经典信号对BCG 感染后RAW264.7 细胞的坏死率和ROS 含量的调控规律是一致的，由此可见，Wnt经典信号通过降低BCG 感染后巨噬细胞的ROS 含量，从而下调了PARP 和AIF 的蛋白表达量，最终阻止了细胞坏死。