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超微结构特征及免疫调控:结核分枝杆菌感染下的Wnt经典信号

时间:2023-11-17 理论教育 版权反馈
【摘要】:为了检测Wnt3a 及BCG 感染后巨噬细胞的外部形态及内部结构变化,我们将Wnt3a 和BCG 单独处理及二者共同处理的RAW264.7 细胞经过固定等制样程序,采用扫描电镜和透射电镜分别观察细胞表面及内部结构,并对凋亡细胞形态和数量进行分析。BCG 感染后出现大量死亡细胞,细胞膜破损内容物因溢出而出现大量干瘪细胞。

超微结构特征及免疫调控:结核分枝杆菌感染下的Wnt经典信号

细胞凋亡后细胞表面及细胞内部结构会发生重大变化,主要表现为细胞表面微绒毛消失,细胞皱缩变圆,胞浆内的细胞器凝聚,细胞核染色质固缩,形成新月状帽形结构沿着核膜分布,核仁消失;质膜发生出芽(budding)并形成由质膜包裹着的凋亡小体。为了检测Wnt3a 及BCG 感染后巨噬细胞的外部形态及内部结构变化,我们将Wnt3a 和BCG 单独处理及二者共同处理的RAW264.7 细胞经过固定等制样程序,采用扫描电镜和透射电镜分别观察细胞表面及内部结构,并对凋亡细胞形态和数量进行分析。

图5-4 不同处理巨噬细胞扫描电镜图

A.Control B.Wnt3a C.BCG D.Wnt3a+BCG,其中红色箭头为标示为凋亡小体

扫描电镜结果显示,经Wnt3a 激活Wnt 经典信号通路后,BCG 感染和未感染的RAW264.7 细胞变圆,表面微绒毛消失,细胞膜表面完整,形成多个大小不等的凋亡小体(图5-4 中红色箭头所示),而对照细胞微绒毛丰富,伸出伪足,细胞膜完好,呈现出巨噬细胞的典型形态。BCG 感染后出现大量死亡细胞,细胞膜破损内容物因溢出而出现大量干瘪细胞。由透射电镜图片观察结果可知,激活Wnt 经典信号通路后,未感染的RAW264.7 细胞变小变圆,表面微绒毛消失,细胞膜表面凸起形成凋亡小体(图5-5 中红色箭头所示),而Wnt3a 结合BCG 处理细胞内可见大量吞噬空泡,但其细胞膜完好并形成凋亡小体,对照细胞核完整,细胞微绒毛丰富,染色质均匀分布。而BCG 感染后出现大量死亡细胞,细胞膜破损并且不完整,细胞器溢出分布在细胞周围。(www.xing528.com)

图5-5 不同处理巨噬细胞透射电镜图

A.Control B.Wnt3a C.BCG D.Wnt3a+BCG,其中红色箭头标示为凋亡小体

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