1.植物种植
在种植植物的花盆中先铺放两层滤纸，然后再放入300 g实验用土。本实验设置4个不同的处理组，每个处理组8个重复。第一个处理组，什么都不种植，作为空白对照；第二个和第三个处理组，分别种植白菜和萝卜；第四个处理组，同时种植白菜和萝卜，为联合种植。种植单一植物的盆中含5株白菜或2株萝卜，种植混合植物的盆中含3株白菜和2株萝卜。温室的温度白天设置在（25±2）℃，晚上设置在（14±2）℃。每天给植物浇水，3周后收获。
2.样品提取和净化
采集植物时，将植物根部轻轻从土壤中移出，任何余下的植物组织都收集起来，然后将植物分为地上部分和根两部分。每一部分均用蒸馏水冲洗3次。先植物和土壤样品进行冷冻干燥，之后碾碎，然后在4℃条件下保存备用。加入13C12-TBBPA标准溶液作为内标，以正己烷/丙酮（体积比为1:1）为溶剂索氏提取24 h，每小时约回流4次。旋转蒸发萃取液至几乎干时，加入100 mL正己烷溶解，再用旋转蒸发仪浓缩至3～5 mL，然后加入15 mL浓硫酸，离心15 min后上层液体用5 mL正己烷清洗，重复两遍，上层回收液经旋转蒸发浓缩至约2 mL。过预先处理过的硅胶固相萃取柱，依次用6 mL正己烷活化，12 mL正己烷淋洗最后用6 mL丙酮洗脱，洗脱液氮吹至几乎干后用甲醇定容，漩涡混匀后待测。
3.仪器操作
首先打开质谱、高效液相色谱和电脑的电源，此时质谱内置的CPU会通过网线与电脑主机建立联系，大概需要1～2 min时间。
（1）高效液相色谱开机及准备程序
①待高效液相色谱通过自检，进入Idle状态后，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。首先打开脱气机（Degasser On），接着进行干洗（Dry Prime）1次，湿灌注（Wet Prime）2次，然后清洗进样针（Purge Injector）1～2次，最后是平衡色谱柱。
②点击液相方法图标进入方法编辑界面。
③点击Inlet图标设置泵的参数。
④在柱温设定页面，设定柱温箱温度以及液相系统的压力参数。
⑤在Pump Gradient页面，设置梯度表。
⑥将待测样品放入棕色进样品后，装入液相色谱自动进样盘。
然后打开氮气钢瓶的阀门，使氮气输出，输出压力为90 psi。
（2）质谱开机程序
①双击电脑桌面上的 MassLynx 4.0图标进入质谱软件。如果打开软件时，质谱内置的CPU与电脑主机的通讯联系还没有建立，则需稍等片刻再进入软件。
②点击质谱调谐图标（MS Tune），进入质谱调谐窗口。
③选择菜单“Options > Pump”，机械泵开始工作，同时分子涡轮泵开始抽真空，此时会有较大噪声出现。等达到真空要求后，状态灯“Vacuum”将变绿。
④点击真空状态图标，查看真空规的状态，确认真空度是否达到要求。
⑤设置源温度（Source Temp）到目标温度，给离子源升温，升温过程会需要一段时间。(www.xing528.com)
⑥在质谱调谐窗口选择要使用的离子模式，Ion Mode>Electrospray-。
⑦点击进入Source界面，设定Source界面里的各项参数。
⑧打开氩气钢瓶，点击气体图标通入氩气，调整氩气流量。
⑨点击操作按钮（Operate ），加上质谱电压，此时，操作按钮的颜色会从红变绿。
⑩点击图标，进入Analyser界面，设定Analyser界面里的各项参数。
待高效液相色谱、质谱都准备好后，将二者相连，并在电脑软件上点击连接图标将二者CPU相连。
（3）创建项目
每次测定都需要创建不同的项目（Project），项目的后缀为 .pro，以便进行数据管理，所创建的每个项目都有对应的子目录。
（4）创建质谱采集分析方法
在Masslynx软件主界面点击质谱方法（ MS Method ）图标，进入质谱方法编辑界面，然后点击MRM图标，打开MRM功能编辑器（MRM Function Editor），对各项参数进行设置，建立质谱采集分析方法。
（5）建立一个新的样品表，并对样品表信息进行编辑
确认色谱、质谱都准备好后，点击运行图标，运行样品。在样品测定过程中，需要随时进行检查，以便出现问题后，可以及时处理。
（6）样品测定完成后关机
①先点击质谱调谐图标进入调谐窗口。
②点击Standby让质谱进入待机状态时，此时状态灯由绿变红。
③点击气体图标关闭氩气，然后关闭氩气钢瓶。
④停止高效液相色谱流速，将液相色谱管路从质谱移开放入废液瓶，冲洗色谱柱1 h左右，冲洗液相系统以及进样针2～3次。冲洗完毕后，关机。
⑤设置离子源温度到常温，给离子源进行降温，当温度降到常温时，点击气体图标关闭氮气。然后关闭电脑。
⑥关闭质谱，最后关闭质谱、高效液相色谱和电脑的电源。
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