一、实验目的
（1）通过实验掌握过滤法检测空气微生物技术。
（2）学习检测空气中细菌的基本方法。
二、实验原理
利用无菌液体过滤空气，将空气中的微生物截留在液体中。取此液体定量培养、计数，计算出空气中细菌或其他微生物的含量。
三、实验仪器和材料
实验所需仪器有高压蒸汽灭菌器、生化恒温培养箱、盛有200 mL无菌水的锥形瓶（500 mL）5个、盛有10 L水的塑料桶（15 L）5个、玻璃器皿。
实验所需材料有琼脂、蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、氢氧化钠、盐酸。
四、实验步骤
1.培养基的制备
营养琼脂培养基：蛋白胨10 g，牛肉膏3 g，氯化钠3 g，琼脂15 g，蒸馏水1 000 mL，pH 7.4～7.6。称取上述各成分混合加热，充分溶解，用质量分数为10%的氢氧化钠溶液和质量分数为10%的盐酸调节pH为7.4～7.6，置于高压蒸汽灭菌器121℃灭菌20 min，倒入平皿约占1/2高度，冷却，备用。
2.准备过滤装置
图2-3 过滤法测定空气微生物采样器(www.xing528.com)
按图2-3安装空气采样器。
3.采样点的选择及放置采样器
随机选择具有代表性的采样点。室内采样一般为五点梅花式（图2-1），室外采样可根据空气污染程度及地势变化进行。按图2-2所示，将5套空气采样器分别放在5个采样点上。
4.采样
打开塑料桶的水阀，使水缓慢流出，外界空气经喇叭口被吸入盛有无菌水的锥形瓶（采样器）中。10 L水流完后，10 L空气中的微生物被截留在200 mL无菌水中。
5.测过滤液中细菌数
将5个塑料桶的过滤液充分摇匀，分别吸取1 mL过滤液于无菌培养皿（设平行样3个）中，再将融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基倒入含菌液的培养皿中，摇匀，静置，凝固后置于37℃恒温箱培养48 h。
6.计算平均菌落数
按下式分别求出每套采样器的细菌数，再求5套采样器细菌数的平均值，即为所测环境空气微生物数。
五、思考题
测定空气微生物时，选择采样点应考虑哪些因素？
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