空气细菌检测成果：滤膜法实验结果

一、实验目的

（1）通过实验掌握滤膜法检测空气微生物技术。

（2）学习检测空气中细菌的基本方法。

二、实验原理

用仪器吸取空气，通过计算空气通过滤膜的过气量来计算空气中细菌的含量。

空气中含有悬浮物，悬浮物大都由尘埃、细菌、酵母菌、霉菌、病毒及花粉等组成。空气中的细菌可用膜滤器过滤检测。

三、实验仪器和材料

实验所需仪器有高压蒸汽灭菌器、生化恒温培养箱、膜滤器、玻璃器皿、500 mL三角瓶、1 000 mL烧杯平皿、滤膜。

实验所需材料有琼脂、蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、氢氧化钠、盐酸。

四、实验步骤

1.培养基的制备

营养琼脂培养基：蛋白胨10 g，牛肉膏3 g，氯化钠3 g，琼脂15 g，蒸馏水1 000 mL，pH 7.4～7.6。称取上述各成分混合加热，充分溶解，用质量分数为10%的氢氧化钠溶液和质量分数为10%的盐酸调节pH为7.4～7.6，置于高压蒸汽灭菌器121℃灭菌20 min，冷却，备用。

2.菌种采集(www.xing528.com)

（1）将膜滤器用煮沸法灭菌。

（2）将灭菌过的滤膜（φ0.2～2μm）放在膜滤器的滤板上，把膜滤器拧紧。

（3）用5～10 L/min的速度，吸取检验所需的空气量50～100 L。

（4）用气流速度计或微气压计来测定。

3.操作步骤

（1）将营养琼脂培养基融化后，装入平皿中，以皿高的1/2为准，凝固后待用。注意要无菌操作。

（2）将过滤细菌的滤膜取下，将菌面向上，即滤膜的平滑面贴在培养基上，各样细菌都会生长良好。

（3）也可将滤膜放到已精确量过的无菌生理盐水中，充分洗涤干净。滤膜上的菌被制成菌悬液。

（4）可采用平板分离式稀释法检测细菌总数及细菌分类。

（5）将平皿放入生化恒温培养箱内，37℃～38℃，恒温培养24 h。

4.数据计算

每立方米空气中所含的细菌数的计算式为：