【摘要】：掌握吲哚实验技术。掌握鉴别分解胰蛋白胨中色氨酸的微生物方法。吲哚可与Kovac氏试剂中的对二甲基氨基苯甲醛反应，生成红色的玫瑰吲哚。若在两液体界面或界面以上呈红色，说明反应呈阳性，该菌能分解胰蛋白胨中的色氨酸。
一、实验目的
（2）掌握吲哚实验技术。
二、实验原理
有些细菌能够利用胰蛋白胨中的色氨酸产生吲哚。吲哚可与Kovac氏试剂中的对二甲基氨基苯甲醛反应，生成红色的玫瑰吲哚。反应式如下：
三、实验器材
（1）菌种：大肠杆菌和枯草芽孢杆菌新鲜斜面培养菌。
（2）试剂：Kovac氏试剂、乙醚。
（3）培养基：1%胰蛋白胨水培养基（详见附录三 常用培养基）5支。
（4）实验仪器与用具：恒温培养基、接种耳、酒精灯。
四、实验步骤(www.xing528.com)
1.标记
取胰蛋白胨水培养基试管4支，其中2支标记A，2支标记B。另取1支培养基标记为C。
2.接种
通过无菌操作将大肠杆菌和枯草芽孢杆菌分别接种到A、B管。C管不接种，作为空白对照。
3.培养
将5支培养基试管置于恒温培养箱，30℃～37℃培养24 h。
4.观察
取出培养基试管，分别沿管壁缓慢加入Kovac氏试剂，加入量为培养液表面上厚3～5 mm。若在两液体界面或界面以上呈红色，说明反应呈阳性，该菌能分解胰蛋白胨中的色氨酸。若呈色不明显，可再加4～5滴乙醚并摇动，直至乙醚分散到培养液中。静置片刻，至乙醚上浮至液面后，再沿管壁缓慢加入Kovac氏试剂，观察颜色变化。
五、思考题
吲哚实验中为什么加乙醚？
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