【摘要】:实验仪器和用具:恒温培养箱、酒精灯、接种耳、镊子。另取1支培养基标记为C。
一、实验目的
(1)了解微生物产硫化氢实验基本原理。
(2)掌握微生物产硫化氢实验技术。
二、实验原理
很多细菌能分解有机硫化物产生硫化氢,硫化氢与铁盐或铅盐可生成黑色硫化亚铁或硫化铅沉淀。其反应式如下:
三、实验器材
(1)菌种:大肠杆菌和沙门氏菌新鲜斜面培养菌。
(2)试剂:醋酸铅滤纸条。制作方法:将剪成0.5~1 cm宽的滤纸条(长度据试管和培养基高度而定),置于5%~10%的醋酸铅溶液中浸透,取出,置于烘箱中在50℃~60℃的条件下烘干,再用高压蒸汽灭菌器121℃灭菌15 min,备用。
(3)培养基:蛋白胨胱氨酸培养基5支。(详见附录三 常用培养基)
(4)实验仪器和用具:恒温培养箱、酒精灯、接种耳、镊子。
四、操作步骤(www.xing528.com)
1.标记
取蛋白胨胱氨酸培养基试管4支,其中2支标记A,2支标记B。另取1支培养基标记为C。
2.接种
采用无菌操作将大肠杆菌、沙门氏菌分别接种到A、B管。C管不接种,作为空白对照。分别用镊子夹一棉塞放于各管培养基液面上,再夹一条醋酸铅滤纸放于棉塞,滤纸不接触液面。
3.培养
将上述5支培养基试管置于恒温培养箱,30℃~37℃培养3 d、7 d、14 d。
4.观察记录
纸条变黑者为阳性,不变色者为阴性。
五、思考题
本实验中,为何要用棉塞将醋酸铅滤纸条与培养基液面隔开?
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