过滤除菌适用于不能用热力灭菌的培养基或其他溶液，如抗生素、维生素、血清、疫苗等。
一、实验目的
（1）学会过滤除菌器的装置过程。
（2）掌握过滤除菌技术。
二、实验原理
过滤除菌是将液体通过某种微孔材料，使微生物与液体分离。在细菌过滤器中，过滤板常用玻璃、陶瓷、硅藻土或石棉等材料制成，孔眼很小，细菌不能通过。液体通过过滤板后，其中的细菌被除去。在进行过滤除菌前，细菌过滤器和接纳液体的器皿，都必须进行加压蒸汽灭菌，以防杂菌污染。
玻璃滤器的滤板由玻璃粉热压而成，具有微孔。过滤除菌常用的玻璃滤器型号为G5和G6。
石棉板滤器又称蔡氏滤器，是一种常用的细菌过滤器，使用混合纤维树脂微孔滤膜，孔径有0.2μm和0.45μm等不同规格。一般认为0.2μm孔径滤膜可阻留去除大部分细菌。如果灭菌要求不高，0.45μm的滤膜也可将细菌计数减少至每毫升少于10个甚至为0个。蔡氏滤器由一块石棉制成的圆形滤板和一个特制的漏斗组成（图1-28、图1-29）。漏斗分上、下两节，上节为截面为圆形的金属筒，下节为金属漏斗，两节之间由3个活动螺旋固定，便于装卸。使用时拆开上、下两节，滤板放在漏斗的金属筛板上，再加上节，然后拧紧螺旋，将待滤溶液置于滤器中抽滤。每次过滤必须用一张无菌滤板。石棉板滤器因容积大小不同而有各种型号，石棉板也有不同规格，使用时必须根据需要适当搭配。
图1-28 蔡氏滤器
图1-29 蔡氏滤器结构示意图
三、实验仪器
实验器材包括生化恒温培养箱、真空泵、过滤器、1 000 mL烧杯、1 000 mL三角瓶、量筒等。(www.xing528.com)
四、实验试剂
实验试剂包括抗生素、血清、疫苗。
五、实验操作步骤
（1）在组装使用前，滤器、接液瓶、垫圈分别用纸包好，滤膜可放在平皿内用纸包好，经高压（121℃）灭菌30 min，待用。
（2）在无菌室内，将过滤装置按图1-30组装。
图1-30 过滤装置安装示意图
（3）用灭菌的无齿镊子安放滤膜，滤膜的粗糙面向上，平滑面粘在隔板上。
（4）将待除菌液体注入滤器内，开动真空泵，除菌过程开始。
（5）将滤液置于生化恒温培养箱内，23℃培养48 h。若无菌生长，即可使用。
六、思考题
过滤除菌的优、缺点分别是什么？
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