一、目的
学习使用显微镜观察活性污泥样品中微型动物的种类、数量及状态。
二、实验器材
（1）活性污泥法曝气池混合液。
（2）显微镜、小量筒、滴管等。
（3）计数板。
如果没有微型动物计数的计数板（微型动物，即使是原生动物，也比细菌大得多，一般的细菌或血球计数板都不适用），则可按照如下方法制作。
采用厚质玻璃割成9 cm长，4 cm宽的长方块，玻璃厚度以0.3～0.4 cm为宜。利用氢氟酸腐蚀法，在玻璃板中央刻上100个（10×10）小方格。小方格的大小没有严格规定，只要一片大号盖玻片能盖满格子有余和便于在显微镜下计数就可以了。将大号盖玻片切成宽约0.7 cm的玻条，用阿拉伯树胶粘在计数用的小方格的四周，使形成一圈凸起的边框。这样，就制成了一块微型动物计数板，如图1-23所示。
氢氟酸腐蚀法划方格的方法如下：先在玻璃表面均匀地涂一薄层石蜡，然后用尖针在石蜡层上刻出所要求的方格，再以氢氟酸蒸汽进行重蒸。
三、计数方法及步骤
（1）将活性污泥法曝气池混合液轻轻搅拌均匀。如混合液较浓，则可1∶1稀释。稀释方法：取10 mL量筒1个，加混合液5 mL再加蒸馏水5 mL，轻轻搅拌均匀，即成1∶1稀释液。
（2）取洗净的滴管一支（滴管一滴水的体积应预先标定，一般每一滴水的体积约为1/20 mL），吸取摇匀的混合液或己稀释的混合液，加1滴到计数板的中央方格内，然后盖上一块洁净的大号盖玻片，使玻片的四周正好搁在计数板凸起的边框上，侧视如图1-23B所示。
图1-23 微型动物计数板
（3）用低倍显微镜进行计数。所滴加的液体不一定布满整个100格小方格。在显微镜下计数时只要把充有液体的小方格，挨着次序一行行地计算即可。记录各种动物的活动能力、形态结构等。(www.xing528.com)
原生动物中有不少种类是群体，须将群体和群体上的个体分别计数。
（4）计算。设在一滴水中测得钟虫30只，则每毫升混合液中含有钟虫30×2×20=1 200只，如测得轮虫10只，则每毫升混合液含轮虫10×2×20=400只（如滴管每一滴体积为1/20 mL，所观察的液体是1∶1稀释的曝气池混合液）。
四、记录
微型动物观察记录表见表1-4。
表1-4 微型动物数量记录表
五、注意事项
（1）如无计数板，则可用下法进行计数。取洗净的滴管1支（其一滴水的体积应预先标定）吸取混合均匀的曝气池混合液或已稀释的混合液，滴1滴在载玻片的中央，将盖玻片（以方形为好）轻轻盖在水滴上，要避免盖玻片内形成气泡。
用低倍镜观察标本并计数。计数时，可先将视野放在盖玻片的右上角（根据各人的习惯，也可放在另一角），然后移动玻片，视野即可随之从上而下、从左而右通过。当前一个视野数完，并做好记录后，再换第二个视野，如此往复将整个盖玻片下面的动物全部计数完毕。注意在调换视野时，不可使相邻的视野重叠或遗漏。最后换算成1 mL混合液中的动物数。
生物滤池和生物转盘上的生物膜形成胶状，浓度大，一般都必须稀释后计数，可在实践中摸索适当的稀释比。
上述计数方法仅适用于原生动物和轮虫，对个体较大的微型动物和线虫等，则须加大计数容量，以免造成误差。
（2）为了避免微生物游动而影响计数，可用接种环加一环氯化汞（HgCl2）饱和溶液以杀死微生物。
六、思考题
怎样通过了解微型动物种类或数量变化来反映废水处理情况？
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