针刺对新生小鼠脑细胞凋亡的影响-生理学研究与教学探讨

［摘要］目的　观察针刺(acupuncture，acu)对缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemia encephalopathy，HIE)新生小鼠脑组织细胞凋亡及caspase-3表达的影响，以探讨针刺的作用机理。方法　出生7d新生小鼠，随机分为假手术组(sham)、模型组(model)和针刺组(acu)。采用TTC染色检测脑梗死面积；DAPI染色检测脑组织形态结构；原位末端标记技术(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡；免疫组织化学法检测脑组织caspase-3表达。结果　与假手术组相比，模型鼠脑梗死面积增大，患侧脑组织大量细胞坏死脱落，排列疏松，凋亡细胞数和caspase-3阳性细胞数明显增加；与模型组相比，针刺组小鼠脑梗死面积缩小，患侧脑组织排列较致密整齐，凋亡细胞数和caspase-3阳性细胞数明显减少。结论　针刺具有减轻HIE小鼠脑组织损伤的作用，这可能与其降低脑组织caspase-3表达、减少细胞凋亡有关。

［关键词］缺氧缺血性脑病；针刺；细胞凋亡；caspase-3

Effect of acupuncture on cell apoptosis in ipsilateral brain of neonatal hypoxic-ischemia encephalopathy model mice

［Abstract］Objective The effect of acupuncture on cell apoptosis and caspase-3 expression was observed in ipsilateral brain of neonatal hypoxic-ischemia encephalopathy(HIE)model mice in order to investigate its mechanism.Methods7d mice were randomly divided into three groups，sham group，model group and acupuncture group.HIE was induced by occluding left common carotid artery，followed by placing mice in a hypoxic chamber containing 8%oxygen balanced with 92%nitrogen for 100 min.TTC staining was used to examine brain infarct，DAPI staining was used to examine brain pathology，TUNEL was used to detect apoptosis and immunofluorescent staining was used to examine the caspase-3-positive cells in the ipsilateralbrain.Results Mice in model group showed infarct in the left hemisphere，more cells loss，more TUNEL-positive cells and more caspase-3-positive cells in the ipsilateral brain compared to mice in sham group，while mice in acupuncture group showed smaller infarct in the left hemisphere，less cells loss，less TUNEL positive cells and less caspase-3-positive cells compared to mice in model group.Conclusion Acupuncture could alleviate brain injury after HI procedure，which might be related to decreasing caspase-3 expression，thus inhibiting apoptosis.(www.xing528.com)

［Key words］ hypoxic-ischemic encephalopathy； acupuncture； apoptosis； caspase-3

新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)是新生儿时期较为常见的疾病之一，是指各种围生期窒息引起的部分或完全缺氧、脑血流减少或暂停而导致胎儿或新生儿脑损伤［1］。新生儿HIE具有较高致死率和致残率［2-3］，因而对该病的研究引起了广泛的关注。近年来临床研究报道，针刺治疗HIE及其后遗症日渐增多，并证实其有效性［4-5］，然而有关针刺治疗急性期HIE的报道很少，其治疗急性期HIE的作用机理研究也并不多见。有研究表明，细胞凋亡参与了新生鼠缺氧缺血性脑损伤的发病过程［6-7］，而caspase-3被认为与细胞凋亡关系最为密切，是细胞凋亡过程的主要执行者。本课题组前期研究观察到，造模后3d HIE新生小鼠脑组织中细胞凋亡数和caspase-3表达增加［8-11］。那么，针刺治疗能否通过降低脑组织中caspase-3表达、减少细胞凋亡而减轻急性期缺氧缺血性脑损伤?为此，本文在前期研究的基础上，采用7d新生小鼠制备HIE模型，了解针刺治疗急性期缺氧缺血性脑损伤的效果，观察针刺对脑组织细胞凋亡和caspase-3表达的影响，以探讨针刺的作用机理，为促进针刺在急性期HIE临床防治中的应用提供科学依据。