在6.2节已经得到了化学方法配制的不同浓度的和溶液及其组合对HaCaT 细胞的细胞毒性,这里进一步研究了这些化学方法配制的RONS溶液对A875细胞的毒性。不同浓度的及二者的组合对A875细胞的毒性如图6.4.4所示。
图6.4.4 不同浓度的N和N及它们的特定组合对A875细胞的细胞毒性
n.s.表示无显著性差异,* P<0.05;** P<0.01;***P<0.001
由图6.4.4可以看到,与HaCaT 细胞的细胞毒性实验结果类似,和溶液及它们的组合对A875细胞同样几乎没有细胞毒性。
H2O2溶液以及H2O2与和混合溶液对A875细胞的毒性如图6.4.5所示。由图6.4.5(a)可以看到,H2O2溶液对A875细胞的毒性也存在着明显的剂量依赖效应,但是两种细胞在含有相同浓度的H2O2培养基中培养24h后,A875细胞的存活率比HaCaT 细胞的存活率要高。例如,当细胞培养基中H2O2浓度为400μmol/L时,A875细胞的存活率仍然接近40%,但相同情况下HaCaT 细胞的存活率已经低于10%(见图6.2.2(a))。同样地,尽管H2O2溶液中加入会增加对A875细胞的毒性,但是在相同条件下仍然是A875细胞的存活率要高于HaCaT 细胞的存活率,如图6.4.5(c)所示,200μmol/LH2O2加上2mmol/L的才能将大部分A875细胞杀死。
图6.4.5 H2O2溶液、H2O2与N的混合溶液、H2O2与N的混合溶液对A875细胞的细胞毒性实验结果(www.xing528.com)
n.s.表示无显著性差异,*P<0.05;** P<0.01; ***P<0.001
将图6.4.4和图6.4.5的实验结果与6.2节中图6.2.1和图6.2.2中相同情况下RONS溶液对HaCaT 细胞毒性的结果进行对比可以发现,不同浓度的和溶液及它们的组合,不仅不能选择性杀死癌细胞A875,反而对正常的HaCaT细胞的毒性更强。例如,当浓度为400μmol/L的H2O2溶液单独作用时,HaCaT细胞的存活率已经下降到了10%以下,如图6.2.2(a)所示,而相同情况下A875细胞的存活率在40%左右,如图6.4.5(a)所示。
HaCaT 细胞和A875细胞在用N-APPJ处理不同时间得到的PAM 中培养24h后的细胞存活率如图6.4.6(a)所示,对应的PAM 中和的浓度如图6.4.6(b)所示。
图6.4.6(a)所示结果表明,两种细胞在PAM-5中培养24h后,细胞的存活率都在90%以上,而且相互之间无显著性差异。然而,在PAM 对应的NAPPJ处理时间增大后,虽然两种细胞的存活率都会下降,但是A875细胞的存活率却始终高于HaCaT 细胞的。例如,当用PAM-20 处理两种细胞时,HaCaT 细胞几乎全部死亡,但是A9875的存活率却仍然在30%左右。这说明相同条件下PAM 不仅不能选择性杀死A875细胞,反而对HaCaT 细胞的毒性更大。图6.4.6(b)的结果显示PAM 中和的浓度随着等离子处理时间的增加而增加,在PAM-20中,和的浓度分别在200μmol/L、75μmol/L和30μmol/L左右。
图6.4.6 PAM 对HaCaT 细胞和A875细胞的细胞毒性以及PAM 中H2O2、N和N的浓度变化情况
n.s.表示无显著性差异,*P<0.05;** P<0.01;***P<0.001
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