大气压等离子体射流对小鼠神经元亚型分化的影响

上述结果表明，等离子体可以明显地促进小鼠C17.2-NSCs细胞向神经元的分化，而神经元有多种亚型，如运动神经元、多巴胺能神经元、胆碱能神经元、五羟色胺能神经元、GABA 能神经元等。不同的神经元亚型有其特异标记蛋白，NF200常用来标记成熟神经元；ChAT 是胆碱能神经元中表达的重要神经递质；LHX3和Hb9是运动神经元的标记蛋白；GABA 是一种重要的抑制性神经递质，在GABA 能神经元中特异表达；五羟色胺也是一种重要的神经递质，表达于五羟色胺能神经元中；而酪氨酸羟化酶（tyrosinehydroxylase，TH）参与酪氨酸向多巴胺的转化，在多巴胺能神经元中发挥重要生理学作用[12～13]。

因此，本节利用免疫荧光技术对分化的神经元亚型进行鉴定。从图4.4.1中可以看出，培养6天的等离子体处理组中有大量的胆碱能神经元（ChAT 阳性，红色）和运动神经元（LHX3阳性，红色），且神经元趋向成熟（NF200阳性，红色）；五羟色胺能神经元（Serotonin阳性、红色）和GABA 能神经元（GABA阳性，红色）却很少；而多巴胺能神经元（TH 阳性，红色）未被检测到。West-ernBlot结果也显示等离子体处理组中NF200、ChAT、LHX3和Hb9有明显上调，与免疫荧光方法取得的结果一致。

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图4.4.1　神经元亚型鉴定[5]

因此可以认为，等离子体处理可以明显促进神经元的成熟，且多为胆碱能神经元和运动神经元。