【摘要】:观察有丝分裂和染色体最好采用根尖压片技术以获得完整的分裂相和染色体相。各种植物的根尖均可用来制片,而洋葱根尖、蚕豆根尖与玉米根尖,因其染色体大而数目少,是常用的实验材料。其制片技术如下:生根洋葱用鳞茎,蚕豆、玉米和小麦用种子,在15℃左右进行培养生根。必要时可隔着一层滤纸用拇指平稳地下压盖片将细胞压至扁平,使染色体散开。
观察有丝分裂和染色体最好采用根尖压片技术以获得完整的分裂相和染色体相。各种植物的根尖均可用来制片,而洋葱根尖、蚕豆根尖与玉米根尖,因其染色体大而数目少,是常用的实验材料。醋酸洋红染色因其简便易行,是常用的染色法。其制片技术如下:
(1)生根
洋葱用鳞茎,蚕豆、玉米和小麦用种子,在15℃左右进行培养生根。
(2)取材
主根、侧根的根尖均可使用,在分裂相较多的时间段(多数植物在上午11点左右,有的在下午5点左右)切取根尖,立即固定或进行低温及药剂(常用0.1%秋水仙碱溶液)处理后固定。
(3)固定
用现配的醋酸酒精固定液浸泡1h,将细胞杀死,使其内部结构固定,保持完好。然后转移至70%乙醇中低温贮存。
(4)解离
用1mol/L盐酸在室温下解离8-10min。(www.xing528.com)
(5)水洗
用蒸馏水浸洗2-3次,每次3min。
(6)染色
将根尖置于洁净的载片上,切弃根冠(约1mm)和伸长区,再将分生区切成若干薄片,加一滴醋酸洋红染液浸染。
(7)压片
盖上洁净的盖片,在酒精灯火焰上微烤(注意勿使染液沸腾),然后平放于桌面上,用解剖针柄对着有材料的地方轻轻敲击盖片,使细胞散开(勿使盖片左右错动)。必要时可隔着一层滤纸用拇指平稳地下压盖片将细胞压至扁平,使染色体散开。
(8)镜检
往盖片边缘添加一点点染液,用滤纸擦去盖片外多余的染液,然后镜检。理想的片子还可进行脱水与封藏制成永久玻片标本。
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