高水平耐药细菌监测实用手册

肠球菌对氨基糖苷类的耐药性有2种，即中度耐药和高度耐药。中度耐药菌株（MIC为62～500μg／ml）系细胞壁屏障所致，此种细菌对青霉素或糖肽类与氨基糖苷类药物联用时敏感；高水平氨基糖苷类耐药肠球菌（high-level aminoglycoside-resistant Enterococci，HLARE）由于细菌产生质粒介导的氨基糖苷钝化酶AAC（6′）-APH（2″），庆大霉素和链霉素对其的MIC分别为≥500μg／ml和≥2 000μg／ml，对青霉素或糖肽类与氨基糖苷类药物的联用呈现耐药。因此，测定该菌对氨基糖苷类高剂量药物的敏感性对临床治疗具有重要意义。

由万古霉素耐药肠球菌（Vancomycin-resistant Enterococci，VRE）所引起的感染治疗十分棘手，而且还存在将万古霉素耐药性传到毒力更强的细菌如金黄色葡萄球菌的危险，因此临床实验室对VRE菌株的检测具有重要的意义。VRE菌株的检测除可采用万古霉素纸片扩散法外，其他方法如脑心浸液琼脂筛选法、琼脂稀释法和肉汤稀释法以及E试验等。HLARE和VRE的检测如下。

1.HLARE菌株的检测按标准纸片扩散法操作准备好的MH 药敏平板和0.5麦氏浊度单位的菌液，并将菌液均匀涂布于平板，将120μg／片的庆大霉素纸片或300μg／片的链霉素纸片贴于平板上，35℃过夜24 h培养后阅读结果，抑菌圈直径≥10 mm为敏感，≤6 mm 者为耐药，抑菌圈直径为7～9 mm 者必须采用肉汤稀释法或琼脂稀释法测定庆大霉素或链霉素的MIC以确定其耐药性。(www.xing528.com)

2.VRE菌株的检测按标准纸片扩散法操作准备好的MH 药敏平板和0.5麦氏浊度单位的菌液，并将菌液均匀涂布于平板上，将30μg／片的万古霉素纸片贴于平板上，35℃孵育24 h后阅读结果，抑菌圈直径≥17 mm 为敏感，≤14 mm 为耐药，15～16 mm 者为中敏。在抑菌圈内出现薄雾状或任何其他生长现象者均应视为耐药。中敏的菌株应进行万古霉素的MIC测定或按CLSI文件推荐的VRE筛选试验（含6μg／ml万古霉素的BHI琼脂平板，操作方法同VISA和VRSA的检测）进行测定。