细菌真菌耐药监测手册-常规质控操作

（一）生长质控和无菌质控

每块药敏板条上应留有一孔不含抗菌药物的生长对照孔和一孔未接种菌液的无菌对照孔。只有当生长对照孔中细菌生长良好且无菌对照孔透明澄清时，本次试验结果才有效。

（二）接种菌量质控

实验室应定期进行菌落计数以确保接种菌液浓度达到要求。例如在常规药敏质控接种完成后质控菌株ATCC 25922的终浓度为5×105 CFU／ml，为确保接种菌量正确可进行菌落计数，从不含药物的生长质控孔中吸取0.01 ml加入10 ml生理盐水中进行103倍稀释，旋涡振荡混匀后取0.1 ml稀释液加到合适的营养琼脂上，将菌液涂布至干燥，培养后生长约50个菌落则提示接种菌量符合要求。

（三）细菌纯度质控(www.xing528.com)

CLSI文件中建议对接种菌液进行纯度检查，可取部分接种菌液于非选择性培养基上划线后过夜培养，若发现菌液存在污染则需要重复药敏试验以获取准确的药敏结果。

（四）菌株质控

质量控制中的关键要素是选取合适的标准参考菌株，如大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、粪肠球菌ATCC 29212、金黄色葡萄球菌ATCC 29213、肺炎链球菌ATCC 49619、流感嗜血杆菌ATCC 49247和ATCC 49766等，均是琼脂稀释法和肉汤稀释法MIC测定时的标准菌株。产β-内酰胺酶大肠埃希菌ATCC 35218、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705和ATCC BAA-2814、大肠埃希菌NCTC13353是检测β-内酰胺酶抑制剂合剂敏感性的标准菌株。上述菌株可从美国典型菌种保藏中心或其他可靠的供应商处获取，但需遵循CLSI或供应商提供的保存和传代培养程序。