【摘要】:流动相的洗脱方式,若以流动相与固定相的极性相对大小来分类,有正相洗脱和反相洗脱;若以流动相溶剂的组成和配比是否有变化来分类,有等度洗脱和梯度洗脱。但对于成分复杂的样品,往往不能兼顾某些性质相差很大组分的分离要求,此时需要用梯度洗脱。在一个分析周期内,将流动相的溶剂浓度配比,按一定程序不断改变的洗脱方式,称为梯度洗脱。
流动相的洗脱方式,若以流动相与固定相的极性相对大小来分类,有正相洗脱和反相洗脱;若以流动相溶剂的组成和配比是否有变化来分类,有等度洗脱和梯度洗脱。在正相洗脱和反相洗脱中,既可采用等度洗脱方式,也可采用梯度洗脱方式。
1.正相洗脱与反相洗脱
正相色谱的洗脱方式就是正相洗脱,它是流动相的极性小于固定相的洗脱方式,极性小的组分保留弱,先出色谱柱;极性大的组分保留强,后出色谱柱。
反相色谱的洗脱方式就是反相洗脱,它是流动相的极性大于固定相的洗脱方式,极性大的组分保留弱,先出色谱柱;极性小的组分保留强,后出色谱柱。
2.等度洗脱与梯度洗脱(www.xing528.com)
用恒定配比的溶剂系统的洗脱方式,称为等度洗脱。它是最常用的色谱洗脱方式,具有方法简便、重复性好、色谱柱易再生等优点。但对于成分复杂的样品,往往不能兼顾某些性质相差很大组分的分离要求,此时需要用梯度洗脱。
在一个分析周期内,将流动相的溶剂浓度配比,按一定程序不断改变的洗脱方式,称为梯度洗脱。梯度洗脱可以使一个复杂样品中性质相差很大的组分,能在各自适宜的分离条件下(即保留因子k适宜)分离。
对复杂样品组分的色谱分离,采用等度洗脱法一般难以达到所有组分完全分离,采用适当的溶剂配比梯度进行梯度洗脱,则可以实现所有组分的完全分离。梯度洗脱可以缩短分析周期,改善峰形减少拖尾,提高检测灵敏度(因峰宽变窄、峰高变高),提高分离效果。但是梯度洗脱有时会引起基线漂移,重复性不如等度洗脱。
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