液-液分配色谱法：仪器分析成果

1.分离机理

流动相与固定相都是液体的色谱法，称为液-液色谱法（Liquid-Liquid Chromatography，LLC），全称液-液分配色谱法。固定液被涂渍或键合在惰性载体上，溶质分子依据其在固定液和流动相中溶解-析出分配动态平衡时，分配系数为K=cs/cm。由tR=t0(1+K∙Vs/Vm)可知，对于一定的色谱柱来说，Vm和Vs是一定的，故分配系数K大的组分保留时间tR则长。在选择分离条件时，务必使样品的各组分在固定相和流动相中的溶解度产生差别，K或k有差别，才能产生分离。

2.正相色谱法与反相色谱法

按照固定相与流动相的相对极性大小关系，可分为正相色谱法（NPC）和反相色谱法（RPC）两类。正相色谱的分离对象是从极性到中等极性的化合物；反相色谱的分离对象是从中等极性、弱极性到非极性的化合物。(www.xing528.com)

流动相极性小于固定相极性的液-液色谱法，称为正相液-液色谱法，简称正相色谱法，也称正相洗脱。在进行正相洗脱时，样品中极性小的组分先流出色谱柱，极性大的组分后流出色谱柱。这是因为极性小的组分在固定相（极性、中等极性）中的溶解度小，K或k小，tR就小，所以先流出色谱柱。

流动相极性大于固定相极性的液-液色谱法，称为反相液-液色谱法，简称反相色谱法，也称反相洗脱。在进行反相洗脱时，样品中极性大的组分先流出色谱柱，极性小的组分后流出色谱柱。这是因为极性大的组分在固定相（非极性、弱极性）中的溶解度小，K或k小，tR就小，所以先流出色谱柱。

在推测不同极性组分在上述两种色谱法的固定相中的溶解度时，依据相似相溶原理来判断。当组分分子与固定液分子的极性、官能团、立体构型等越相近，溶解度就越大。组分在反相洗脱与正相洗脱中的出峰顺序正好相反。反相色谱法比正相色谱法应用更广泛。