仪器分析书籍中定性分析技术及应用概述

色谱定性分析就是要确定未知组分的色谱峰是什么物质，主要通过保留值对比和与其它仪器联用来实现定性分析。

1.保留值对比定性

保留值对比定性是色谱法最常用的方法。它将试样组分与标准品在相同操作条件下测得的保留值比较，如果数值在允许误差范围内，可推测该组分可能与标准品是相同的组分。

保留时间定性是药物分析最常用的方法，对于复杂的多组分分析，常用两种或多种不同极性固定相的色谱柱进行定性实验，以提高定性的可靠性。

保留指数定性的优点是它只与固定相种类有关，不受其它实验条件的影响，不少化合物的保留指数可从文献查到。由于已知保留值的物质毕竟有限，测定也不太方便，因而利用保留值定性的方法在药物分析中很少使用。

2.与其它仪器联用定性

色谱法的分离能力是非常强的，但它不能对已分离的每一组分进行直接定性。利用上述保留值定性有很大的局限性，一是已知标准物数量有限，有时根本就没有；二是许多物质的保留值十分接近或相同，常常影响定性结果的准确性。而“四大谱”的质谱、红外光谱、紫外光谱和核磁共振波谱对有机化合物具有很强的定性能力，但只能对单一纯组分进行定性，对混合物中的某一组分却无法进行定性。如果将色谱法的分离功能与光谱法的定性鉴别功能有机结合在一起，充分发挥二者的长处，对色谱分离后的组分直接进行光谱定性鉴别，这就是色谱-光谱联机定性。(www.xing528.com)

在光谱-色谱联机定性的各种方法中，两类仪器之间必须有适当的“接口”连接起来，从而成为一个整体——联用仪，这时作为定性的仪器部分，如质谱仪、红外光谱仪、紫外光谱仪、核磁共振波谱仪就成为联用仪的一个专用检测器。现在这些联用仪器和技术已经成熟，成为现代仪器分析的重要工具。

3.色谱指纹图谱鉴别

根据色谱的分离能力，人们总有办法将一个复杂样品中的各个组分分离开来，但要确定每个峰是什么化合物并不是一件容易的事。例如确定一个中药提取物的有效成分，少则几十个组分，多则上百个组分，要确定每一个组分既不可能、也没有必要。在此情况下，人们联想到司法鉴定中采用人的指纹的唯一性来识别和确定人“身份”的方法，利用在相同色谱条件下得到复杂样品的色谱图，也具有“唯一性”的特点，通过对色谱图形状的比对来识别、鉴定复杂组分样品，这种方法称为色谱指纹图谱法。

色谱指纹图谱法目的并不是鉴定每一个组分，而是通过鉴定其中一些有代表性的组分来识别、鉴定复杂样品。一张完整的色谱图包括三方面信息：一是色谱峰的位置，即保留值（GC、HPLC的保留时间或保留体积，TLC的比移值），这是色谱定性的依据；二是峰强度，即峰高或峰面积，这是色谱定量的依据；三是峰的区域宽度，包括峰宽、半峰宽和标准差，它与保留值结合是评价色谱柱分离效能的指标。在上述三方面信息中，保留值和峰强度是识别、鉴定复杂组分样品的主要依据，是色谱指纹图谱的主要组成部分。利用现代计算机软件，将色谱指纹图谱进行数字化，就是将保留值和峰强度进行数字化，数字化后的色谱指纹图谱就称为色谱指纹谱。

指纹图谱技术是一种通过分析、比较和评价来进行识别和鉴定的技术，所以在采用指纹图谱识别和鉴定物质时，一定要有一个已知的参考样品图谱或指纹图谱库，以便作为参考标准进行分析、比较和评价。当有已知标准物质和已知的指纹图谱库时，该技术可作为定性分析的方法，并对其中的某些色谱峰进行定量分析。指纹图谱技术目前应用最多的是生成过程的质量控制。它可用于控制生产过程中的原料、中间体及最终产品在每批生产时的一致性，减少每一批产品间的差异。