正相分配色谱和反相分配色谱在仪器分析中的应用

分配色谱：固定相为涂渍在惰性载体上的固定液，以与其不相混溶的溶剂做流动相，利用被分离组分在固定相或流动相的溶解度差别而实现分离。如图8-2所示。

图8-2　分配色谱示意图

Xm—流动相中的溶质分子；Xs—固定相中的溶质分子

分配色谱中，溶质分子在两相中的溶解度呈动态平衡，在流动相和固定相中的浓度之比称为分配系数，即

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式中，Xs为分布在固定相中的组分；Xm为分布在流动相中的组分；n(Xs)和n(Xm)分别为组分在固定相和流动相中物质的量；Vs为固定相体积；Vm为流动相体积。

在分配色谱中，溶质分子在固定相中的溶解度越大，或者流动相中的溶解度越小，分配系数就越大。显然，分配系数取决于两相的组成和性质。分配色谱的优点在于其较好的重现性，一定温度下，同一组分在整个色谱过程中的分配系数是定值。另外，因不同极性的物质均能找到相应极性的溶剂进行分离，因此分配色谱的应用极其广泛。

在分配色谱中，根据固定相和流动相的极性相对强度，分为正相分配色谱（NPC）和反相分配色谱（RPC）。流动相极性比固定相小的，称为正相分配色谱；反之，流动相极性比固定相大的，称为反相分配色谱。

在正相分配色谱中，固定相有水、各种缓冲溶液、甲醇、甲酰胺等强极性溶剂，或按一定比例混合，流动相有石油醚、醇类、酮类、酯类、卤代烃等或它们的混合物，适用于强极性至中等极性组分的分离，极性稍小的组分先流出色谱柱。

在反相分配色谱中，固定相有硅油、液状石蜡即极性小的有机溶剂作为固定液，流动相常用水、或各种水溶液、甲醇等，适用于非极性、弱极性组分的分离，极性大的组分先流出色谱柱。反相色谱应用为更广泛。