【摘要】:随着浓度的增大,二聚体增多,660nm吸收峰减弱、610nm吸收峰增强,吸收光谱形状发生改变,从而使吸光度与浓度的线性关系发生偏离。
Beer定律是有限定律,需严格遵守以下条件:入射光是单色光;被测溶液是均匀的稀溶液;吸光物质之间相互不发生作用。如果超出这些条件,测定结果则会偏离定律关系。导致偏离的条件因素主要是化学因素和光学因素两方面。
1.化学因素
浓度限制 Beer定律适用于浓度小于0.01mol/L的稀溶液。吸光系数与浓度无关,但与介质的折射率n有关。只有稀溶液体系的折射率n可视为常数,所以物质在稀溶液体系中的吸光系数ε才是常数。故物质浓度必须控制在稀溶液范围。
解离、缔合及溶剂化作用 例如,亚甲蓝阳离子水溶液体系的吸收光谱,单体的吸收峰在660nm处,二聚体的吸收峰却在610nm处。随着浓度的增大,二聚体增多,660nm吸收峰减弱、610nm吸收峰增强,吸收光谱形状发生改变,从而使吸光度与浓度的线性关系发生偏离。可通过控制溶液浓度方法避免影响。(www.xing528.com)
溶剂对吸收光谱也有影响,因为溶剂的极性对吸光物质的紫外吸收波长、强度和形状产生影响,溶剂的酸碱性还会影响待测物质的物理性质和组成,从而影响其吸光性质。
2.光学因素
影响Beer定律的光学因素主要来自两方面,一是仪器制造的光学器件达不到要求,包括非单色光、杂色光和非平行光等;二是被测样品溶液达不到要求,包括溶液有悬浮颗粒对光的散射和反射光等。现代精密仪器制造技术已将光学器件引起的误差基本克服了。来自悬浮颗粒物引起的光学因素,可以通过过滤,使滤液变成澄清透明后再测定,则可避免。
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