针刺眼眶静脉法采血及心脏抽吸血液的方法

实验动物的采血方法很多，按采血部位不同，可分为尾部采血、耳部采血、眼部采血、心脏采血、大血管采血等。具体而言，主要包括剪尾采血、眼眶静脉丛采血、断头采血、心脏采血、颈静（动）脉采血、腹主动脉采血、股动（静）脉采血、耳缘剪口采血、耳静脉采血、后肢外侧小隐静脉采血、前肢内侧皮下头静脉采血、毛细血管采血等。选择什么采血部位与使用何种采血方法，需视动物种类、检测目的、试验方法及所需血量而定。

采血时应注意以下几点：采血用具和采血部位一般需进行消毒；若需抗凝血，应在注射器或试管内预先加入抗凝剂；所需采血量应控制在动物的最大安全采血量范围内；一次采血过多或连续多次采血都可能影响动物健康，甚至导致动物贫血或死亡。

（一）大鼠、小鼠采血方法

1.剪尾采血

剪尾时首先把动物固定或麻醉，露出尾巴，将尾巴置于40℃～50℃热水中，浸泡数分钟，或用酒精、二甲苯反复擦拭，使尾部血管扩张，擦干后剪去尾尖（小鼠约1mm～2mm，大鼠约5mm～10mm），让尾尖流出血液滴入盛器或直接用吸管吸取。自尾根部向尾尖按摩，血液会自尾尖流出。

如需多次采取鼠尾静脉血液，每次采血时，将鼠尾剪去很小一段，取血后，先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口上，使伤口外形成火棉胶薄膜，以保护伤口。

2.针刺尾静脉采血

固定动物，消毒，擦干。操作时，实验者在尾尖部向上数厘米处用拇指和食指抓住，对准尾静脉用注射针刺入后立即拔出（如图7-25）。采血后用局部压迫的方法进行止血。

图7-25　针刺尾静脉采血

3.眼眶静脉丛采血

穿刺采用一根特制的长7～10cm硬的玻璃取血管，其一端内径为1～1.5mm，另一端逐渐扩大，细端长约1cm，将取血管浸入1%肝素溶液，干燥后使用。采血时，左手抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并轻轻压迫其颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突。右手将取血管尖端插入内眼球与眼球之间，轻轻向眼底方向刺入，当感到有阻力时即停止刺入，旋转取血管以切开静脉丛，血液即流入取血管中（如图7-26）。采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。本法在短期内可重复采血。小鼠一次可采血0.2～0.3mL，大鼠一次可采血0.5～1.0mL。

图7-26　眼眶静脉采血

4.颈（股）静脉或颈（股）动脉采血

将动物麻醉，剪去一侧颈部外侧的被毛，做颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量（如图7-27）。大鼠多采用股静脉或股动脉，方法是大鼠经麻醉后，剪开其腹股沟处皮肤，即可看到股静脉，把此静脉剪断或用注射器采血即可，股动脉较深需剥离出，再采血。

图7-27　颈静脉采血

5.摘眼球采血

采血时，实验者用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用镊子或止血钳迅速摘除眼球，眼眶内很快流出血液（如图7-28）。

图7-28　摘眼球采血

6.断头采血

当需要较大量的血液，而又不需继续保存动物生命时采用此法。左手捉持动物，使其头略向下倾，右手持剪刀猛力剪掉鼠头，让血液滴入盛器（如图7-29）。小鼠可采血0.8～1.0mL，大鼠可采用5～8mL。

图7-29　断头采血

7.心脏采血

心脏采血操作时，将动物仰卧固定在板上，剪去胸前区部位的被毛，消毒皮肤。在左侧第3～4肋间，实验者用左手食指摸到心博处，右手持带有4～5号针头的注射器，选择心搏最强处穿刺。当针穿刺入心脏时，血液由于心脏搏动的力量自动进入注射器（如图7-30）。

若不需保留动物存活时，也可麻醉后切开动物胸部，将注射器直接刺人心脏抽吸血液。操作时，先用乙醚等麻醉剂深麻醉动物后将其固定在板上，剖开胸腔，然后将注射器针头刺入右心室后立即抽血。开胸时，要尽可能减少动物出血。

图7-30　小鼠心脏取血

（二）兔采血方法

1.耳中央动脉采血

兔耳中央有一条较粗、颜色较鲜红的中央动脉。采血时，实验者用左手固定兔耳，右手持注射器，在中央动脉末端，沿着动脉平行的方向刺入动脉，刺入方向应朝向近心端。不要在近耳根部进针，因为容易刺透血管造成皮下出血。一般用6号针头采血。取血完毕后注意止血。此法一次可抽取10～15mL。

由于兔胆小易惊，兔耳外周的血液循环对外界环境刺激极为敏感，耳中央动脉易发生痉挛性收缩。因此，抽血前须让兔耳充血，并在其动脉扩张而未发生痉挛性收缩前立即抽血。若注射针刺入后尚未抽血，血管已发生痉挛性收缩，应将针头放在血管内固定不动，待痉挛消失血管舒张后再抽。若在血管痉挛时强行抽吸，会形成血肿。

2.耳缘静脉采血

此法多用于家兔的中量采血，可反复采取。将兔放在保定栏内固定，拔去兔耳郭边缘被毛，可见沿着耳郭边缘走行的静脉。消毒并揉搓血管后，用左手食指和中指夹住静脉近心端，拇指和小指夹住耳郭边缘部分，无名指和小指放在耳郭下作垫。为使血管扩张，可用手指轻弹或用二甲苯涂擦血管局部，用6号针头沿耳缘静脉远心端刺入血管。采血完毕拔出针头，用拇指轻轻按住注射部位止血。也可以用刀片在血管上切一小口，让血液自然流出即可。取血后，用棉球压迫血。此法一次可采血5～10mL。

3.后肢胫部皮下静脉采血

将兔仰卧固定后（或由一人将兔固定好），拔去兔胫部的被毛，在胫部上端股部扎以橡皮管后，在胫部外侧浅表皮下可清楚见到皮下静脉。实验者用左手两指固定好静脉，右手取带有5号针头的注射器由皮下静脉平行方向刺入血管，抽动针栓如血进入注射器，即可采血。一次可取2～5mL。采血后用棉球压迫采血部位止血，时间一般需1分钟。如果止血不当，可能会造成皮下血肿，影响连续多次采血。

4.心脏采血

兔的心脏采血一般不需开胸，基本方法同小动物的心脏采血。实验者将兔仰卧固定，将兔左侧胸部心脏部位去毛，消毒。用左手触摸左侧第3、4肋间，选择心跳最明显处穿刺。一般由胸骨左缘外3mm处将注射针头插入第3～4肋间隙。当针头正确刺入心脏时，由于心搏的力量，血会自然进入注射器。采血中回血不好或动物躁动时应拔出注射器，重新确认后再次穿刺采血。经6～7天后，可以重复进行心脏采血。(www.xing528.com)

5.颈动（静）脉采血

当需要大量采血时可使用劲动脉采血。实验者用戊巴比妥钠将兔麻醉，仰卧位固定，以颈正中线为中心广泛剃毛，消毒。从距头颈交界处5cm～6cm的部位用直剪剪开皮肤，将颈部肌肉用无钩镊子推向两侧，暴露气管，即可看到平行于气管的白色迷走神经和桃色的颈动脉，颈静脉位于外侧，呈深褐色。分离一段颈动脉或颈静脉，结扎远心端，并在近心端放一缝线，在缝线处用动脉阻断钳夹紧动脉，在结扎线和近心端强线之间用眼科剪刀作T或V形剪口，并将尖端呈斜形的塑料导管经切口处向心脏方向插入1cm～2cm。结扎近心端缝线，将血管与塑料管固定好，将塑料管的另一端放入采血的容器中。缓慢松开动脉夹，血液便会流出。

（三）豚鼠采血方法

1.耳缘切口采血

先将豚鼠耳消毒，用刀片沿血管方向割破耳缘，切口约长0.5cm，在切口边缘涂上20%的枸橼酸钠溶液，防止血凝，则血可自切口处流出。此法采血每次可采0.5mL左右。

2.心脏采血

同家兔心脏采血方法相同，步骤一致。

3.背跖静脉采血

背跖静脉有外侧跖静脉和内侧跖静脉，均可用于采血。操作时，由助手固定动物，并将豚鼠后肢膝关节伸直到操作者面前，操作者将动物脚面用酒精消毒，并找出外侧跖静脉或内侧跖静脉后，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿注射器刺入静脉采血。拔针后会立即出血，并可见刺入部位呈半球隆起，应用纱布或脱脂棉压迫止血。反复取血时，两后肢交替使用。

4.股动脉采血

将动物仰位固定手术台上，剪去腹股沟区的毛，麻醉后，局部用碘酒消毒，切开长2～3cm的皮肤，使股动脉暴露及分离，然后用镊子提起股动脉，远端结扎，近端用止血钳夹住，在动脉中央剪一小孔，用无菌玻璃小导管或聚乙烯、聚四氟乙烯插入，放开止血钳，血液即由导管口流出。一次可采血10～20mL。

（四）猴采血方法

1.后肢皮下静脉采血

先将猴两前臂向背部方向拉，并用绷带将其两腕部绑紧，由一人用左手抓住其两臂，右手抓住猴头和后颈部，另一人左手抓住一侧后肢的膝关节部位，右手抓住取血侧后肢的股部，使猴后肢皮下静脉扩张。取血者用左手抓住后肢膝关节处并将后肢固定好，剪去取血部位被毛，消毒。实验者右手取连有7号针头的注射器，针头沿静脉平行方向向心刺入血管，即可进行采血，完毕后压迫止血。

2.末梢采血

采少量血液往往采用末梢采血方法。

（1）下唇采血：下唇血管丰富，是理想的末梢采血部位。先将猴放入固定椅保定，并蒙住猴的双眼，消毒其下唇黏膜，用消毒三棱针刺破下唇正中0.5cm，用玻片或试管取血，取血完毕用棉球压迫止血。

（2）手掌采血：将猴前肢从笼的间隙拉出，在手掌大鱼际或小鱼际有毛与无毛的分界线附近，酒精消毒后用三棱针穿刺采血，取血完毕用棉球压迫止血。

（3）手指采血：将猴前肢或后肢从笼的间隙拉出，任意取前后肢任何一个指（常用食指或中指），酒精消毒后用三棱针穿刺采血，取血完毕用棉球压迫止血。

3.心脏采血

将猴仰卧位保定于手术台上，在左侧胸壁第4、5肋间，用左手食指触摸心跳最最明显处，剪去局部被毛，用碘酒、酒精消毒，采用带7号针头的注射器，边进针边回抽，见到血液立即固定针头进行采血，采血完毕迅速退出针头，用消毒纱布轻轻压迫针口，让猴静卧数分钟再送回笼子。

此外，还可以从猴的耳缘静脉、颈静脉、股动脉采血。

（五）树鼩采血方法

1.眼眶静脉丛采血

先将麻醉好的树鼩抓在手里，采血者的左手捏住树鼩的后颈部平放于手术台，应防止动物窒息。取血时左手拇指及食指轻轻压迫树鼩的耳部两侧皮肤，使眼球稍微突出，眶后静脉丛充血。采血者右手持长3～4cm硬质玻璃虹吸管（毛细管内径0.5～1.0mm），使采血器与树鼩面成45°夹角，由眼内角刺入，斜面朝向眼球，刺入面朝向眼眶后界。刺入深度约4～5mm。旋转进入感到有阻力时即停止推进，轻轻向外回一点，血液能自然流出虹吸细管，然后让树鼩头部稍倾斜使血流入试管中。当得到所需的血量后，左手松开树鼩头部，同时将采血器拔出，用干棉球压眼角穿刺孔，防止出血。左、右两眼可轮换采血。体重120～180g的树鼩每次可采血1.0～1.5mL。

2.前腔静脉采血

需要实验助手抓好树鼩，仰卧位固定，近气管至锁骨窝处向心脏方向进针，最大采血量为0.5～1.5mL。

3.心脏采血

树鼩的心脏较小，且心率较快，心脏采血反复穿刺容易致其死亡，故间隔时间长，需要血量大时可用此方法。用5号半的针头，采血时左手抓握树鼩头、颈、背部皮肤，仰卧位，实验者右手持注射器，针尖偏向左，在倒数4～5肋间心脏搏动比较快的地方进针，一次性采血可到最大量3.0～5.0mL。如需多次用血，最好每次不要超过总血量的30%，进针时要准，不能反复抽插，抽血时速度不宜太快，以防止心肌缺血，出针时用棉球按压住进针点。

4.股动、静脉采血

仰卧固定树鼩在助手手中，拉直下肢，轻压腹股沟，使血管充盈，看到股内侧凸出的血管，用酒精擦拭，注射器45°夹角进针，吸出血液，一般能采1.0～1.5 mL，对树鼩的健康没有影响。

5.尾部穿刺采血

先将树鼩尾部腹面剪毛，用橡筋扎紧尾根，酒精消毒和擦拭，使树鼩尾静脉充盈。用6号或7号针管，45°刺入树鼩尾腹部静脉，取血量0.5～1.0 mL。如果长期反复取血，应先靠近树鼩尾末端穿刺，之后再逐渐向尾根部穿刺。