分子生物学实验试剂配制

1.溶液Ⅰ

50mmol/L葡萄糖，25mmol/L Tris-HCl（pH值8.0），10mmol/LEDTA（pH值8.0）。高压灭菌15min，储存于4℃冰箱中。

2.溶液Ⅱ

0.2mol/LNaOH（临用前用10mol/LNaOH母液稀释），1%SDS（从10%SDS母液中稀释，SDS母液可室温保存），现配现用。

3.溶液Ⅲ

60mL 5mol/LKAc，11.5mL冰醋酸，28.5mLH2O，高压灭菌，4℃冰箱保存。溶液终浓度为K+3mol/L，Ac+5mol/L。

4.3mol/L醋酸钠（pH值5.2）

800mL水中溶解408.1 g NaAc·3H2O，用冰醋酸调pH值至5.2，加水定容至100mL，分装后高压灭菌，储存于4℃冰箱。

5.STE缓冲液

0.1mol/LNaCl，10mmol/LTris-HCI（pH值8.0），lmmol/LEDTA（pH值8.0）。

6.STET

0.1 mol/L NaCl，10 mmol/L Tris-HCl（pH值8.0），1 mmol/L EDTA（pH值8.0），5%Triton X-100。

7.TE缓冲液

10mmol/LTris-HCl（pH值8.0），lmmol/LEDTA（pH值8.0）。高压灭菌后储存于4℃冰箱中。

8.RNA酶A母液

将RNA酶A溶于10mmol/LTris-HCl（pH值7.5），15mmol/LNaCl中，配成10mg/mL的溶液，于100℃加热15min，使残留的DNA酶失活。冷却后用1.5mL EP管分装成小份保存于-20℃。(www.xing528.com)

9.溶菌酶（10mg/mL）

用10mmol/LTris-HCl配制，pH值为8.0，临用前配制。

10.苯酚饱和溶液

苯酚溶解后用10mmol/LTris-HCl（pH8值.0）平衡至上清液中的水相pH值升至8。

11.酚-氯仿-异戊醇（25∶24∶1）

三种成分按体积比混合。

12.氯仿-异戊醇（24∶1）

按氯仿∶异戊醇=24∶1体积比向氯仿中加入异戊醇。氯仿可使蛋白变性并有助于水相与有机相的分开，异戊醇则可消除抽提过程中出现的泡沫。

13.电泳所用试剂

①TBE缓冲液（5×）：称取54 g Tris，27.5 g硼酸，并加入20mL 0.5mol/L EDTA（pH值8.0），定溶至1000mL。②上样缓冲液（6×）：0.25%溴酚蓝，40%（W/V）蔗糖水溶液。

14.异丙醇

15.70%冰乙醇

可用95%乙醇配制，-20℃保存备用。

16.5mol/L LiCl

100mL的烧杯中加入30.25 g LiCl，加入不超过100mL的无菌超纯水，磁力搅拌混匀，定容至100mL，121℃灭菌15min。