植物生理研究技术及其应用

细胞组分与发育的研究通常包括下列几个方面:

1.细胞壁的实验技术

主要是关于细胞壁结构、组成成分、功能及其中所含酶类活性的测定。如用显微技术观察细胞壁的结构及其纤维素排列情况;用KI-H2SO4法测定细胞壁的主要成分;用荧光增白剂染色法观察细胞壁是否完整及细胞壁再生情况;细胞壁中过氧化物酶等的测定。

2.原生质的实验技术

用酶制剂消化细胞壁得到完整而有活力的原生质体;用胞质环流、活性染料染色及改变渗透压等方法测定原生质体的活力;用电泳法测定原生质的带电性;用离心法和质壁分离法测定原生质的黏滞性;用固定制片的方法可观察原生质的穿壁运动;用显微镜观察原生质流动情况;用质壁分离法测定物质透过膜的速度及难易程度和测定细胞的渗透势;用染色法测定原生质的等电点,用化学或物理的方法促使两种亲本原生质体融合以得到优质物种,其化学方法是加入诱导剂(如聚乙二醇)诱导原生质体融合,物理方法是用电场或显微操作,离心、振动等机械力促使原生质体融合。(www.xing528.com)

3.亚细胞结构的实验技术

各种亚细胞结构的体积和密度不同,它们的沉降系数也不相同,因此可以用差速离心的方法将各亚细胞结构分级分离出来,再用密度梯度离心法进行纯化。另外还可用不同的方法对亚细胞结构的功能进行测试,如用氧电极法测定线粒体的氧化磷酸化机能。

4.细胞生长发育的实验技术

用无菌培养液培养细胞;用显微技术测定细胞增长数目、细胞大小,用离心法测细胞体积;用称重法测细胞重量等。