正常人体功能测定血清尿素氮的二乙酰一肟法

【目的】 了解二乙酰一肟法测定血清尿素氮的原理、操作方法及临床意义。

【原理】 二乙酰在强酸加热的条件下与尿素缩合成红色的4，5-二甲基-2-氧咪唑化合物（Fearom反应），颜色深浅与尿素氮的含量成正比。因二乙酰不稳定，故试剂中用二乙酰一肟代替，后者与强酸作用产生二乙酰。

【器材】 试管及试架、吸量管、水浴箱、722分光光度计。

【试剂】

1.酸性试剂　在三角烧瓶中加无氨去离子水约100ml，然后缓缓加入浓硫酸44ml，及85％磷酸66ml，冷至室温后，加入氨基硫脲50mg及硫酸镉（3CdSO4·8H2O）2 g，溶解后用无氨去离子水定容至1 000ml。置棕色瓶中，4℃冰箱可稳定6个月。

2.179.9mmol/L二乙酰一肟溶液　称取二乙酰一肟20 g溶于无氨去离子水中并定容至1 000ml，置棕色瓶内，4℃冰箱可保存6个月。

3.14mmol/L尿素氮标准液　称取干燥纯尿素42.0mg，溶于少量无氨去离子水中，移入容量瓶，再加无氨去离子水稀释至100ml，加0.1 g叠氮钠或氯仿数滴防腐，4℃冰箱可稳定6个月。

【操作】

（1）取3支16mm×10mm试管，按下表进行操作：(www.xing528.com)

混匀，置沸水浴中煮沸12min，取出置冷水中冷却3～5min，在波长540 nm处比色，以空白管调零，分别读取测定管吸光度Au及标准管吸光度As。

（2）计算：血清尿素氮（mmol/L）=Au/As×14。

【附注】

1.参考范围　3.6～14.2mmol/L。

2.临床意义　尿素是人体内蛋白质分解代谢的最终产物之一，由肾脏排泄，血清尿素氮的测定可以反映肾脏的排泄功能。尿素氮浓度受多种因素的影响，可分为生理性因素和病理性因素两个方面。

（1）生理性因素：血清尿素氮的浓度与摄入的蛋白质量密切相关。蛋白质摄入量增加，血清尿素氮增加，反之则减少。

（2）病理性因素：血清尿素氮浓度病理增加的原因可分为肾前性、肾性和肾后性3个方面：①肾前性主要见于心力衰竭、消化道或手术大出血、创伤、烧伤等疾病引起的休克，还可见于剧烈呕吐、幽门梗阻、肠梗阻和长期腹泻等；②肾性如急性肾小球肾炎、慢性肾炎、慢性肾盂肾炎、肾结核、肾肿瘤、肾病晚期、肾衰竭及中毒性肾炎等；③肾后性疾病如前列腺肿大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等导致的尿路受压等。

血清尿素氮减少较为少见，妊娠妇女由于血容量增加以及胎儿同化作用可导致尿素氮减少；因尿素主要在肝脏合成，严重的肝病，如肝炎合并广泛性肝细胞坏死时，导致肝脏合成尿素的功能障碍，血尿素氮清减少。