正常人体功能：血清葡萄糖测定实验

血糖测定是临床生化检验中最常用的项目之一，测定血中葡萄糖的含量，有助于糖尿病的诊断及治疗。这里主要介绍葡萄糖氧化酶法测定血糖。

【目的】 了解葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖的原理、操作方法及临床意义。

【原理】 葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶（peroxidase，POD）在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色的醌类化合物，即Trinder反应。其颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。

【器材】 试管及试管架、吸量管、水浴箱、722分光光度计。

【试剂】

1.0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0）　溶解无水磷酸氢二钠8.67 g及无水磷酸二氢钾5.3 g于800ml蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠（或1mol/L盐酸）调节pH至7.0，然后用蒸馏水定容至1 000ml。

2.酶试剂　取葡萄糖氧化酶1 200单位，过氧化物酶1 200单位，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml中，用1mol/LNaOH调节pH至7.0，加磷酸盐缓冲液定容至100ml。置4℃冰箱保存，至少可稳定3个月。

3.酚试剂　酚100mg溶于100ml蒸馏水中（酚在空气中易氧化成红色，可先配成500 g/L的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释）。

4.酶酚混合试剂　酶试剂及酚试剂等量混合，4℃冰箱可以存放1个月。

5.12mmol/L苯甲酸溶液　溶解苯甲酸1.4 g于蒸馏水约800ml中，加热助溶，冷却后加蒸馏水定容至1 000ml。

6.100mmol/L葡萄糖标准贮存液　称取无水葡萄糖（预先置80℃烤箱内干燥恒重，移置于干燥器内保存）1.802 g，以12mmol/L苯甲酸溶液溶解并移入100ml容量瓶内，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至100m l刻度处，混匀，移入棕色瓶中，置冰箱内保存。

7.5mmol/L葡萄糖标准应用液　吸取葡萄糖标准储存液5ml，于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。(www.xing528.com)

【操作】

（1）取3支16mm×10mm试管，按下表进行操作。

混匀，置于37℃水浴中，保温15min，在波长505 nm处比色，以空白管调零，分别读取测定管吸光度Au及标准管吸光度As。

（2）计算：血糖（mmol/L）=Au/As×5。

【附注】

1.参考范围　空腹血糖为3.89～6.11mmol/L。

2.临床意义

（1）生理性血糖增高见于饱餐后和精神紧张状态时。

（2）病理性血糖增高主要见于：①糖尿病（最常见）；②某些内分泌性疾病，如甲状腺功能亢进、肾上腺髓质肿瘤、胰岛α细胞瘤等；③颅内压升高，如颅内出血，颅外伤等；④由于脱水引起的高血糖，如呕吐、腹泻和高热等。

（3）生理性血糖降低多见于饥饿或剧烈运动，注射胰岛素或口服降血糖药过量。

（4）病理性血糖降低见于：①胰岛B-细胞增生或肿瘤等，使胰岛素分泌过多；②对抗胰岛素的激素不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退等；③严重肝病患者，肝脏不能有效地调节血糖。