急性动物实验基本操作技术

（一）切口和止血

用哺乳动物进行实验时，在做皮肤切口之前，应先将预定手术部位及其周围的长毛剪去。然后选好确切的切口部位和范围，必要时做出标志。切口的大小要适当，既要便于实验操作，但也不可损伤过大。术者先用左手拇指和另外4指将预定切口上端两侧的皮肤绷紧固定，右手持手术刀，以适当的力量，一次全线切开皮肤和皮下组织，直至肌层表面。若肌纤维走行方向与切口方向一致，可剪开肌膜，用止血钳或手指将肌纤维钝性分离至所需长度，否则便需将肌肉横行切断，并用线结扎肌肉残端止血，切口由外向内，应外大内小，以便观察和止血。

在手术过程中，必须及时注意止血。微血管渗血，用温热盐水纱布轻压即可止血。不可揩擦组织，以防组织损伤和血凝块脱落。较大血管出血，需先用止血钳将出血点及其周围的少许部分组织一并夹住，然后用线结扎。更大血管出血，或血管虽不很大，但出血点较多且比较集中（如肌肉的横断面），最好用针线缝过局部组织，进行贯穿结扎，以免结线松脱。大动脉破裂出血时，切不可用有齿的镊子或血管钳直接夹住管壁，而应先用纱布压住出血部位，吸干血后，小心移开纱布，观察出血点位置，迅速用动脉夹（或止血钳）夹住血管残端，再进行结扎止血。

开颅过程中如果颅骨出血，可用湿纱布吸去血液后，迅速用骨蜡涂抹止血。如遇硬脑膜上的血管出血，可结扎血管残端，或用烧灼器封口。如果是软脑膜出血，应该轻轻压上止血海绵，促进血液凝固而止血。

在实验间歇期间，应将创口暂闭合，或用温盐水纱布盖好，以防组织干燥和体内热量散失。

（二）肌肉、神经与血管的分离

分离肌肉时，应该用止血钳在整块肌肉与其他组织之间，顺着肌纤维方向，将肌肉一块块地分离。决不能在一块肌肉的肌纤维间任意穿插。如果在肌肉纤维间操作，不仅容易损伤肌肉中的血管而引起出血，并且也很难将肌肉分离。若必须将肌肉切断，应先用两把止血钳夹住肌肉（小块或薄片肌肉也可用两道丝线结扎），然后在两止血钳间切断肌肉，并结扎切断的肌肉残端。

神经和血管都是比较娇嫩的组织，因此在分离过程中要耐心、仔细、动作轻柔。切不可用带齿的镊子进行分离，也不许用止血钳或镊子夹持，以免其结构或功能受损。在分离粗大的神经干或血管时，应先用蚊式止血钳将神经或血管周围的结缔组织稍加分离，然后用玻璃分针或眼科镊将其从其周围的结缔组织中游离。游离段的长短，视需要而定。在分离细小的神经或血管时，要特别注意保持局部的自然解剖位置，不要把结构关系弄乱，同时需要用眼科小镊子或玻璃分针轻轻地进行分离。

分离完毕后，在神经或血管的下方穿以浸透生理盐水的缚线（根据需要穿一根或两根），备用。然后盖上一块浸以生理盐水的棉花或纱布，以防组织干燥，或在创口内滴加适量温热（37℃左右）石蜡油，使神经浸泡其中。

（三）气管切开及气管插管术

气管切开术是哺乳类动物急性实验中常用的手术。一方面切开气管和插入气管插管可保证呼吸道通畅；另一方面为实验要求做准备。

气管位于颈部正中位，全部被胸骨舌骨肌与胸骨甲状肌所覆盖。用止血钳分开左右胸骨舌骨肌，在正中线沿其中缝插入并向前后两端扩张，钝性分开肌肉。注意止血钳不能插入过深，以免损伤气管或其他小血管。也可用两食指沿左右胸骨舌骨肌中缝轻轻向上下拉开，此时即可见到气管。

图26-9　气管插管法

在喉头以下气管处，分离一段气管与食管之间的结缔组织，并穿一根浸过生理盐水的棉线备用。于甲状软骨下1～2 cm处的两个软骨环之间，用手术刀或剪刀将气管横向切开，再向头端作一小纵向切口，使呈“┴”形，将口径适当的气管插管由切口向胸端插入气管腔内，用备用线结扎，并再在插管的侧管上打结固定，以防插管滑出（图26-9）。

插入插管后要仔细检查，若管内有血液，必须拔出插管，经止血处理后重新插管。

（四）颈总动脉的分离与插管(www.xing528.com)

在急性实验中，颈总动脉插管作测量动脉血压或放血用。

颈总动脉位于气管外侧，其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。分离两条肌肉之间的结缔组织，可找到呈粉红色较粗大的血管，用手指触之有搏动感，即为颈总动脉。

颈总动脉与颈部神经被结缔组织膜束在一起，称颈部血管神经束。用左手拇指和食指抓住颈皮和颈肌，以中指顶起外翻，有手持蚊式止血钳或玻璃分针，顺血管神经的走行方向分离出颈总动脉。此时应注意：颈总动脉在甲状腺附近有一较大的侧支，为甲状腺前动脉，分离时勿将其切断。分离过程中，应不时地用生理盐水湿润手术野，并拭去附近的血液。为了便于插管或作颈总动脉减压反射等操作，颈总动脉应尽量分离得长些，大鼠、豚鼠2～3 cm；兔3～4 cm；狗4～5 cm。

颈总动脉插管用导管为内径0.1～0.2 cm的塑料管或硅胶管，插入端剪成斜面，其内充满肝素生理盐水溶液。分离的颈总动脉下置两根备用线，用一根结扎动脉远心端，将动脉夹夹住近心端，另一根线打一活结于动脉夹与远心端结扎线之间。用眼科剪在颈总动脉上靠远心端结扎线处，呈45°角剪一“V”形小口，约为管径的1/3或1/2，用导管插入动脉管腔1～2 cm，然后用线打结，其松紧以放开动脉夹后不致出血为度。结扎固定后再围绕导管打结固定，以免导管滑脱。未测量血压前暂勿放开动脉夹。

（五）胆总管插管

沿剑突下正中切开长约10 cm的切口，打开腹腔，沿胃幽门端找到十二指肠，于十二指肠上端背面可见一黄绿色较粗的肌性管道，则为胆总管。

在近十二指肠处仔细分离胆总管，并在其下方置一棉线，于靠近十二指肠处的胆总管上剪一小口，向胆囊方向插入细塑料管结扎固定。塑料管插入胆总管后，立即可见绿色胆汁从插管流出，如不见胆汁流出，则可能是未插入胆总管内，应取出重插。

注意事项：插管应基本与胆总管相平行，才能便之引流通畅。

（六）膀胱与输尿管插管

常用狗、兔等作膀胱或输尿管插管手术。

1.膀胱插管　于耻骨联合上方沿正中线作4～5 cm长切口，再沿腹白线切开腹壁，打开腹腔。暴露膀胱，将其上翻，结扎尿道。在膀胱顶部血管较少的部位剪一小口，插入膀胱插管，用线将切口处的膀胱壁结扎固定于插管上。

注意事项：膀胱插管的另一端为尿液出口处，应低于膀胱水平。

2.输尿管插管　动物手术基本同膀胱插管。

将膀胱翻至体外后，在膀胱底两侧辨认输尿管，在输尿管靠近膀胱处，轻轻分离周围组织，从两侧输尿管下方穿线打一松结，用眼科剪于输尿管上剪一小口，将充满生理盐水的细塑料插管向肾脏方向插入，扎紧松结，两侧输尿管均同样插入插管，连接一“Y”形管引出体外。此时可见尿液从插管中慢慢逐滴流出。

注意事项：①插管要插入输尿管管腔内，不要插入管壁肌层与黏膜之间；②插管方向应与输尿管方向一致，勿使输尿管扭转，以妨碍尿液的流出；③辨认输尿管需与输精管加以区别。