质粒载体和病毒载体：在基因工程研究中的应用

为了得到大量的目的基因，最好的办法是将其导入合适的宿主细胞内进行扩增繁殖，能携带外源性DNA进入宿主细胞的一些DNA分子，称为载体（vector）。良好的载体应具备以下条件：①容易进入宿主细胞，而且能在宿主细胞中复制繁殖，并有较高的拷贝数；②载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点，可供插入外来核酸片段，且插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制；③容易从宿主细胞中分离纯化出来，便于重组操作；④有容易被识别筛选的标记，当其进入宿主细胞、或携带外来的核酸序列进入宿主细胞时都能容易被辨认和分离出来。常用的载体有质粒、λ噬菌体和病毒等。

1.质粒　质粒（plasmid）是细菌或细胞染色质以外能自主复制且与细菌或细胞共生的遗传成分。大多是双链闭环DNA分子，质粒分子本身含有复制功能的遗传结构，能在宿主细胞内独立自主地进行复制，并在细胞分裂时保持恒定地传给子代细胞。一般质粒载体有2～3个抗药基因，有利于用它的抗药性进行下一步筛选工作。理想的质粒，对同一种限制性核酸内切酶只有一个切口。常用的质粒有PBR322、PSC101等。

2.噬菌体　噬菌体（phage）是感染细菌的一类病毒，常用的有λ噬菌体和M13噬菌体等。DNA重组体中经常使用人工改造的λ噬菌体，使其有利于外源基因的插入。(www.xing528.com)

3.DNA病毒　近年来发展了一些用动物病毒DNA改造的载体。如反转录病毒载体、腺病毒载体等。

质粒和噬菌体载体只能在细菌中繁殖，不能满足真核DNA重组需要。感染动物的病毒可改造用作动物细胞的载体。这些载体在限制性核酸内切酶作用下造成切口，使目的基因片段插入到载体DNA分子中，形成重组体，然后导入宿主细胞进行表达。