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Meselson-Stahl实验证实半保留复制

时间:2023-10-22 理论教育 版权反馈
【摘要】:DNA复制方式是半保留复制。1958年,Meselson和Stahl的实验证明,DNA复制为半保留式。他们使用一种特殊的细菌培养液,研究大肠埃希菌DNA复制过程。接着,他们提取经过两次复制的第三代DNA,发现一半为中间密度DNA,另一半为轻DNA,这一结果符合半保留复制的特点,排除了散布式DNA复制的可能性。随着E.coli在轻氮介质中培养代数的增加,轻DNA区带所占的比例越来越大,而中间密度区带越来越少,证明DNA复制确实是半保留式的。

Meselson-Stahl实验证实半保留复制

DNA复制方式是半保留复制。在DNA复制时,以亲代DNA解开的两条单链为模板,按照碱基互补配对原则,各自合成一条与之互补的DNA单链,成为两个与亲代DNA分子完全相同的子代DNA分子,在子代DNA分子中一条链是新合成的,另一条链则是保留亲代的,故称半保留复制。

1958年,Meselson和Stahl的实验证明,DNA复制为半保留式(图21-2)。他们使用一种特殊的细菌培养液,研究大肠埃希菌(E.coli)DNA复制过程。培养液中,氯化铵的氮原子是较重的同位素15N,而不是通常的14N。首先,他们将E.coli在这种重氮介质中连续培养15代,使DNA中的氮原子完全被15N所取代,其DNA密度比通常含14N的DNA大约高1%,两者在氯化铯密度梯度离心中形成不同的区带。然后,他们将这些细胞转移到轻氮(14N)介质中,并提取第二代E.coli DNA,发现其密度介于轻、重DNA之间,提示:全保留式复制是不可能的。接着,他们提取经过两次复制的第三代DNA,发现一半为中间密度DNA,另一半为轻DNA,这一结果符合半保留复制的特点,排除了散布式DNA复制的可能性。随着E.coli在轻氮介质中培养代数的增加,轻DNA区带所占的比例越来越大,而中间密度区带越来越少,证明DNA复制确实是半保留式的。(www.xing528.com)

图21-2 Meselson-Stahl实验——半保留复制的证据

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